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Efeito do peptídeo derivado da proteína NS3 na resposta imune celular de camundongos inoculados com vacinas inativadas do vírus Zika

Processo: 16/26145-3
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de junho de 2017
Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2018
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Pesquisador responsável:Benedito Antônio Lopes da Fonseca
Beneficiário:Jonathan Ballico de Moraes
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Arbovirus   Virologia   Imunidade celular
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Arbovírus | Imunidade Celular | Ns3 | vacina inativada | vacina recombinante | Zikv | Virologia

Resumo

A Zika é uma enfermidade que afeta pessoas de muitos paises tropicais e subtropicais. O agente etiológico da doença é o vírus Zika (ZIKV), um flavivirus de RNA de fita simples, transmitido principalmente pela picada de mosquitos do gênero Aedes, mas com relatos de transmissão sexual, congênita e por transfusão de sangue. Devido a uma possível associação do ZIKV com a microcefalia e Síndrome de Guillain-Barré, é necessário desenvolver estratégias para a prevenção da doença. Entre eles, a melhor medida profilática é a vacinação. A proteína não estrutural NS3 tem sido relatada como um ativador da imunidade celular contra outros flavivírus, cuja atividade tem sido utilizada como um alvo contra infecções virais. Neste contexto, o objetivo deste projeto é testar a eficiência de um peptídeo da proteína NS3, em combinação com uma vacina inativada, visando aumentar a imunogenicidade desta vacina. A NS3 será clonada no vetor pET-26b e expressa em E. coli BL21(DE3). A proteína recombinante NS3 será purificada por cromatografia de afinidade em coluna de níquel. A inativação do ZIKV será realizada por meio de adição de formalina 0,05%. Combinações de NS3 e vacina inativada serão inoculados em 5 grupos de camundongos C56BL/6 e A129 nos dias 0, 7 e 14. No dia 21, o soro hiperimune será coletado dos camundongos C56BL/6 e será avaliado: 1) a produção de anticorpos específicos e neutralizantes contra ZIKV por teste de neutralização por redução de plaques (PRNT); 2) o perfil de citocinas para a resposta Th1 ou Th2 por ELISA e; 3) a existência de linfócitos T específicos contra NS3 por ELISPOT. Os camundongos A129 vacinados serão desafiados com o ZIKV selvagem e calculada a sobrevivência por 10 dias. Os resultados serão analisados pelo software R Studio. Esta abordagem possibilitará a avaliação de uma vacina eficaz e imunogênica para prevenir a infecção com o ZIKV e, consequentemente, o desenvolvimento e manifestações graves desta doença. (AU)

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Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
MORAES, Jonathan Ballico de. Estudo do efeito adjuvante do peptídeo derivado da proteína NS3 na resposta imunológica de camundongos vacinados com vírus Zika inativado. 2018. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.