Avaliação do potencial de produção da proteína recombinante alfa-Glicosidase ácida na linhagem celular humana HKB-11

• Processo: 17/06338-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2019
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Kamilla Swiech Antonietto
• Beneficiário: Matheus Henrique dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/04629-8 - Estabelecimento de uma plataforma de produção de proteínas recombinantes terapêuticas em células humanas, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 19/00309-8 - Perfil de glicosilação da enzima recombinante alfa-glicosidase ácida produzida na linhagem celular humana HKB-11, BE.EP.IC
• Assunto(s): Doença de depósito de glicogênio tipo II Linhagem celular Proteínas recombinantes Terapia de reposição de enzimas Meios de cultura livres de soro Modelos animais de doenças
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alfa glicosidade ácida | células humanas | Cultivos em suspensão | Meios Livres de Soro Fetal Bovino | proteína recombinante | Processos Biotecnológicos

Resumo

O tratamento atual da doença de Pompe, pertencente a classe dos distúrbios de depósito lisossômico, é realizado por terapia de reposição enzimática utilizando a glicoproteína recombinante humana alfa-Glicosidase ácida, produzida em células de ovário de hamster chinês (CHO). Apesar dos resultados satisfatórios, casos de reações imunológicas graves têm sido reportados devido as diferenças entre a proteína recombinante e a nativa do organismo. Há um crescente entusiasmo em relação ao uso de linhagens celulares humanas como plataforma para produção de glicoproteínas recombinantes, por conta de sua capacidade de produzir glicoproteínas o mais próximo possível àquelas encontradas naturalmente no corpo humano, minimizando as possíveis reações imunogênicas. Frente ao exposto o presente trabalho tem como objetivo avaliar o potencial de produção da glicoproteína recombinante humana ±-Glicosidase ácida pela linhagem celular humana HKB-11. Para isto, as células HKB-11 serão geneticamente modificadas e cultivadas em meio livre de soro fetal bovino e em suspensão, condições compatíveis com a escala industrial. Após a modificação gênica será caracterizada a cinética de crescimento e o metabolismo celular bem como a cinética de produção da enzima. Espera-se com este trabalho, avaliar a possibilidade de estabelecimento de uma plataforma alternativa de produção desta enzima, capaz de gerar um produtor com menor imunogenicidade. (AU)