Desenvolvimento do sistema CRISPR/Cas9 em Rhodococcus jostii RHA1 para produção de...
- Auxílios pontuais (curta duração)
| Processo: | 17/05901-7 |
| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Mestrado |
| Vigência (Início): | 01 de julho de 2017 |
| Vigência (Término): | 30 de setembro de 2018 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos |
| Convênio/Acordo: | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) |
| Pesquisador responsável: | Fábio Márcio Squina |
| Beneficiário: | Victoria Ramos Sodré de Castro |
| Instituição-sede: | Faculdade de Engenharia Química (FEQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil |
| Vinculado ao auxílio: | 15/50590-4 - Valorização da lignina em plantas de etanol celulósico: a conversão biocatalítica via ácido felúrico a produtos químicos de alto valor, AP.BIOEN.TEM |
| Assunto(s): | Biotecnologia Rhodococcus |
Resumo A biomassa lignocelulósica, um recurso abundante e de baixo custo, representa uma potencial alternativa ao petróleo para conversão em combustíveis e aditivos químicos. Até um terço da lignocelulose é composto de lignina, um polímero aromático altamente recalcitrante, que é atualmente queimado para produção de energia elétrica ou descartado como resíduo de biorefinarias e indústrias de papel e celulose. Todavia, a lignina representa uma fonte inexplorada de compostos aromáticos que podem ser convertidos em moléculas de alto valor agregado. O ácido ferúlico (FA) é um dos principais componentes da lignina e apresenta potente capacidade antioxidante, podendo ser aproveitado pelas indústrias farmacêutica e cosmética, além de ser um importante precursor para outras moléculas de interesse comercial, como eugenol, vanilina e álcool coniferílico. A bactéria degradadora de lignina, Rhodococcus jostii RHA1, utilizando a peroxidase DyB, é capaz de despolimerizar a lignina em compostos de baixo peso molecular, como o ácido ferúlico, os quais são catabolizados. Devido a seu metabolismo robusto e versátil, espécies de Rhodococcus tem sido alvo de interesse biotecnológico; todavia, a ausência de ferramentas moleculares de manipulação genética têm dificultado a exploração dos recursos destes microorganismos. Neste projeto, propomos desenvolver um novo vetor para expressão do sistema CRISPR/Cas9 em E. coli e Rhodococcus, promovendo assim rápida e eficiente manipulação genética destes organismos. Utilizaremos este sistema para nocautear o gene CouM do metabolismo de ácidos p-hidróxi-cinâmicos em R. jostii RHA1 e RHA045 vdh, levando ao acúmulo de ácido ferúlico quando cultivados em bagaço lignocelulósico de cana-de-açúcar. Esperamos que este projeto estabeleça a primeira aplicação do sistema CRISPR/Cas9 em Rhodococcus, além de desenvolver linhagens e vetores que possam ser usados para valorização de lignina por microorganismos. Também pretendemos disponibilizar o novo vetor E. coli-Rhodococcus para expressão do sistema CRISPR/Cas9 para outros pesquisadores desta área. (AU) | |