Validação do teste de citotoxicidade em fibroblastos e validação do teste do micronúcleo em cultura e padronização da avaliação do teste do micronúcleo por citometria de fluxo

• Processo: 17/20836-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2017
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Cynthia Bomfim Pestana
• Beneficiário: Carmen Coelho Pita
• Vinculado ao auxílio: 16/06985-7 - Desenvolvimento e implementação de métodos alternativos ao uso de animais em boas práticas de laboratório, AP.PIPE
• Assunto(s): Alternativas aos testes com animais Cultura de células Citotoxicidade Citometria de fluxo Testes para micronúcleos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citometria de fluxo | citoxicidade | teste do micronucleo | Cultivo celular

Resumo

A substituição de modelos animais na avaliação de produtos destinados à saúde depende do desenvolvimento e validação de testes alternativos, bem como da sua aceitação pelos órgãos regulamentadores. Na Fase II do presente projeto está previsto o uso do laboratório de cultura de células estruturado na Fase I para implantação de métodos que substituem totalmente o uso de animais: teste de citotoxicidade, teste do micronúcleo in vitro e o teste de irritação dérmica in vitro. Esses testes estão listados nas resoluções do CONCEA. A bolsista em questão deverá auxiliar no estabelecimento do teste de citotoxicidade pelo método do MTT, na padronização do teste do micronúcleo, avaliando a citotoxidade através da estimativa do índice de replicação (IR) dado pela proporção de células mononucleadas, binucleadas e multinucleadas e na padronização da concentração das substâncias de referência capazes de causar alterações cromossômicas e padronização da leitura de DNA por citometria de fluxo para avaliação automatizada dos micronúcleos, de forma a estabelecer as melhores condições de reprodutibilidade e repetibilidade.