Análise da viabilidade e da infectividade de oocistos de Cryptosporidium e cistos de Giardia obtidos de águas superficiais e residuárias pela técnica de cultura celular integrada à PCR em tempo real (ICC-RTqPCR)

• Processo: 17/10175-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2018
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2021
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Sanitária - Saneamento Ambiental
• Pesquisador responsável: Maria Ines Zanoli Sato
• Beneficiário: Ronalda Silva de Araújo
• Instituição Sede: Companhia Ambiental do Estado de São Paulo (CETESB). Secretaria de Meio Ambiente, Infraestrutura e Logística (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Tratamento de água Qualidade da água Giardia Cryptosporidium Oocistos Viabilidade microbiana Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cryptosporidium | Giardia | Pcr | RTqPCR | Saneamento ambiental | Viabilidade | Parasitologia Ambiental

Resumo

O acesso à água potável livre de parasitas patogênicos, especialmente Cryptosporidium e Giardia, continua a ser um desafio para os sistemas produtores de água. Deste modo, o monitoramento e identificação de protozoários liberados no ambiente com potencial de desencadear doenças, portanto viáveis, é essencial para o controle e tomada de decisão dos órgãos gestores e de controle e vigilância da água. O objetivo geral do projeto é avaliar e validar um ensaio in vitro para quantificar oocistos de Cryptosporidium e cistos de Giardia viáveis e infecciosos em amostras de água de manancial superficial e de esgoto tratado para fins de reúso, utilizando técnicas de transcrição reversa/PCR quantitativo (RTqPCR) integradas à cultura celular (ICC). As amostras serão coletadas bimestralmente durante um ano, e concentradas pelos métodos 1623.1 para água superficial e 1693 para efluente tratado, preconizados pela Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos (USEPA). Técnicas de amplificação de ácidos nucleicos e quantificação de transcritos de RNAm integradas à cultura celular (ICC-RTqPCR) serão empregadas para análise da viabilidade de oocistos de Cryptosporidium hominis/parvum e cistos de Giardia intestinalis isolados nas amostras. A aplicação da técnica de ICC-RTqPCR será o principal desafio científico do estudo devido à falta de métodos de ensaios quantitativos confiáveis e rápidos para analisar a viabilidade dos oocistos e cistos em amostras ambientais. Espera-se, contudo, implementar os protocolos validados neste projeto, a fim de superar as dificuldades apresentadas em estudos de avaliação do risco associado à exposição a esses protozoários e no controle da criptosporidíase e giardíase em nosso país, e dessa forma subsidiar os tomadores de decisão quanto a problemáticas desses protozoários nas águas de captação e de reuso.