Investigação dos requerimentos estruturais para o reconhecimento pela proteína VirD4 de toxinas secretadas pelo sistema de secreção do tipo IV.

• Processo: 18/09277-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Shaker Chuck Farah
• Beneficiário: Gabriel Umaji Oka
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/17303-7 - Estrutura e função de sistemas de secreção bacterianas, AP.TEM
• Assunto(s): Xanthomonas Estrutura e função de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bacterial Competition | Molecular Microbiology | Structural Biology | Type IV secretion system | Xanthomonas | Estrutura e Função de Proteínas

Resumo

O VirD4 é uma ATPase que seleciona proteínas a serem secretadas pela maioria dos T4SSs. Nós mostramos que VirD4 de Xanthomonas citri reconhece domínios conservados chamados XVIPCD encontrados no C-terminal de toxinas (X-Tfes) secretadas (Alegria et al., 2005). Estamos interessados em entender a estrutura do complexo VirD4-XVIPCD, como o complexo é transferido para o resto da maquinaria do T4SS e a natureza do papel desempenhado pela ligação e / ou hidrólise do ATP. Como a transferência de toxinas pelo X. citri T4SS mata as células receptoras de E. coli, produziremos uma linhagem X. citri na qual todos os genes que codificam para X-Tfes (XVIPS) foram eliminados. Esta cepa "não assassina", com um T4SS de outro modo funcional, será transformada com plasmídeos expressando X-Tfes específicos. Se isto for bem sucedido, este ensaio pode ser usado para medir quantitativamente a transferência de X-Tfes modificadas com mutações em motivos de reconhecimento específicos. Esta cepa X. citri também será usada para rastrear mutações em outros componentes do T4SS para mapear os requisitos estruturais para a secreção.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

OKA, GABRIEL U.; SOUZA, DIORGE P.; CENENS, WILLIAM; MATSUYAMA, BRUNO Y.; CARDOSO, MARCUS V. C.; OLIVEIRA, LUCIANA C.; LIMA, FILIPE DA SILVA; CUCCOVIA, IOLANDA M.; GUZZO, CRISTIANE R.; SALINAS, ROBERTO K.; et al. tructural basis for effector recognition by an antibacterial type IV secretion syste. PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, v. 119, n. 1, JAN 4 2022. (18/09277-9, 15/18237-2, 17/17303-7, 16/00458-5)