Mecanismos regulatórios de resistência a antibióticos Beta-lactâmicos em Chromobacterium violaceum

• Processo: 18/02465-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: José Freire da Silva Neto
• Beneficiário: Carlos Eduardo Milani Neme
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Anti-infecciosos Resistência microbiana a medicamentos Expressão gênica beta-Lactamases Chromobacterium violaceum Análise in silico Ensaios enzimáticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antibióticos beta-lactâmicos | Chromobacterium violaceum | enzimas beta-lactamases | Regulação resistência antibióticos | resistencia a antibióticos | resistência intrínseca | Resistência a antibióticos

Resumo

O surgimento de patógenos bacterianos resistentes a antibióticos é um problema de saúde pública mundial. A resistência a antibióticos beta-lactâmicos mediada por enzimas beta-lactamases dissemina-se rapidamente entre bactérias Gram-negativas patogênicas. Neste trabalho, pretendemos investigar as razões e os mecanismos regulatórios para a alta resistência intrínseca a antibióticos beta-lactâmicos observada na bactéria Gram-negativa Chromobacterium violaceum, um patógeno oportunista de humanos ubiquamente encontrado no ambiente. Duas potenciais enzimas beta-lactamases das classes B e C codificadas no cromossomo de C. violaceum foram identificadas com análise in silico, além de genes envolvidos na percepção, transdução de sinal e regulação da expressão na via de biossíntese do peptideoglicano. Para estudar estes elementos, serão obtidas linhagens mutantes de C. violaceum com deleção de cada um dos genes que codificam estas enzimas, assim como mutantes para demais elementos que regulem sua expressão. A susceptibilidade destas linhagens mutantes será avaliada para vários antibióticos beta-lactâmicos por ensaios de difusão em disco (antibiograma) e pela determinação da concentração inibitória mínima (MIC). A realização destes ensaios, juntamente com ensaios enzimáticos e de expressão gênica, com diferentes grupos de beta-lactâmicos ou nos mutantes dos reguladores deverá revelar a inducibilidade e especificidade destas enzimas beta-lactamases de C. violaceum. Em conjunto, os resultados obtidos neste projeto deverão contribuir para entender como é regulada a elevada resistência intrínseca de C. violaceum a uma importante classe de antibióticos, podendo trazer subsídios para uma antibioticoterapia mais eficaz no tratamento das infecções por esta bactéria.