Transdução com biblioteca de shRNA e geração de linhagens mutantes em células U2OS

• Processo: 18/19648-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mozart de Azevedo Marins
• Beneficiário: Vânia Casari Mussato
• Instituição Sede: Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP). Campus Ribeirão Preto. Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/03237-2 - Bioprospecção de polifenóis com atividade anticancerígena e investigação dos mecanismos moleculares envolvendo o fator de transcrição p53, AP.R
• Assunto(s): Neoplasias Osteossarcoma Polifenóis Transição epitelial-mesenquimal Apoptose RNA mensageiro Genes p53
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Emt | osteosarcoma | Polifenóis | p53 | shRNA | Biologia Molecular

Resumo

Este bolsista participará dos experimentos de análise da expressão de RNAm e proteínas correspondentes de genes associados aos processos de transição epitélio mesenquimal (EMT) e apoptose, em linhagens de células tumorais tratadas com trans-chalcona e polifenóis selecionados, destacando-se sua relação com a estabilização da proteína p53, DNAJB1 e ATF3. Estes experimentos envolverão técnicas de RT-PCR quantitativo, Westernn-blot, silenciamento gênico e super expressão de genes, o que necessitará uma rotina de procedimentos envolvendo várias padronizações e calibrações. Além disto haverá a manutenção das culturas de células, repiques durante os experimentos, estoque, preparo de meios, isolamento de RNA genômico e outros procedimentos de rotina do laboratório.