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Transdução com biblioteca de shRNA e geração de linhagens mutantes em células U2OS

Processo: 18/19648-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de outubro de 2018
Vigência (Término): 31 de março de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Mozart de Azevedo Marins
Beneficiário:Vânia Casari Mussato
Instituição-sede: Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP). Campus Ribeirão Preto. Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:17/03237-2 - Bioprospecção de polifenóis com atividade anticancerígena e investigação dos mecanismos moleculares envolvendo o fator de transcrição p53, AP.R
Assunto(s):Neoplasias   Osteossarcoma   Polifenóis   Transição epitelial-mesenquimal   Apoptose   RNA mensageiro   Genes p53

Resumo

Este bolsista participará dos experimentos de análise da expressão de RNAm e proteínas correspondentes de genes associados aos processos de transição epitélio mesenquimal (EMT) e apoptose, em linhagens de células tumorais tratadas com trans-chalcona e polifenóis selecionados, destacando-se sua relação com a estabilização da proteína p53, DNAJB1 e ATF3. Estes experimentos envolverão técnicas de RT-PCR quantitativo, Westernn-blot, silenciamento gênico e super expressão de genes, o que necessitará uma rotina de procedimentos envolvendo várias padronizações e calibrações. Além disto haverá a manutenção das culturas de células, repiques durante os experimentos, estoque, preparo de meios, isolamento de RNA genômico e outros procedimentos de rotina do laboratório.