| Processo: | 19/10751-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 21 de agosto de 2019 |
| Data de Término da vigência: | 20 de maio de 2020 |
| Área de conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal |
| Pesquisador responsável: | Marcelo Fábio Gouveia Nogueira |
| Beneficiário: | Ramon Cesar Botigelli |
| Supervisor: | Pablo Juan Ross |
| Instituição Sede: | Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil |
| Instituição Anfitriã: | University of California, Davis (UC Davis), Estados Unidos |
| Vinculado à bolsa: | 16/16841-2 - Ensaio de complementação trofectodérmica para células IPS: uma proposta para avaliação da pluripotência na espécie bovina, BP.DR |
| Assunto(s): | Reprogramação celular Células-tronco pluripotentes induzidas Micromanipulação Quimera Bovinos |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Células induzidas à pluripotência | micromanipulação embrionária | Quimeras embrionárias | Micromanipulação Embrionária e células bovinas induzidas à pluripotência |
Resumo Após o surgimento da reprogramação celular induzida, realizada através da adição de fatores de transcrição "Yamanaka" (Oct4, Sox2, Klf4 e cMyc) às células somáticas, a quantidade de pesquisas relacionadas à geração e manutenção da pluripotência aumentou muito. Ainda, investigações adicionais sobre o estado pluripotente dessas células ainda são necessárias, uma vez que diferentes protocolos, caracterizações e propósitos têm sido utilizados. Uma grande incerteza sobre as iPS é quão preservado é o estado pluripotente destas células. Dos muitos instrumentos utilizados para investigar o estado pluripotente das células tronco (embrionárias ou induzidas), o quimerismo embrionário é destacado. Dentro deste contexto, a partir do ensaio de complementação tetraplóide (TCA) é possível gerar um indivíduo totalmente novo cujo genótipo é maioritariamente/exclusivamente derivado das células pluripotentes utilizadas no embrião quimérico, pelo menos em murinos. No entanto, em bovinos, o TCA não tem a mesma eficiência, por isso desenvolvemos uma nova estratégia para atingir esse objetivo. Essa nova estratégia foi chamada de ensaio de complementação de trofectodérmica (TrCA) e tem um processo de patente pendente. Assim, iPSCs bovinas (biPSCs) são usadas para produzir quimeras embrionárias in vitro com diferentes metodologias (TCA e TrCA) pela agregação de biPSC com embriões (diplóides ou tetraplóides) ou com fragmentos de trofectoderma de embriões produzidos in vitro. A fim de verificar a competência embrionária, avaliaremos o blastocisto quimérico na expressão de genes relacionados à qualidade do embrião, na organização de organelas e núcleo por análise ultraestrutural (descritiva) e também a imunolocalização para diferenciação de tecidos embrionários. Nossa pesquisa pode potencialmente fornecer conhecimento sobre o status da manutenção de biPSC pluripotentes e também sobre a capacidade de gerar novos indivíduos por meio da TrCA em bovinos. (AU) | |
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