Bolsa 20/09887-1 - Virologia, Infectologia - BV FAPESP
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Incidência, fatores de risco, mecanismos patogênicos e prevenção de distúrbios neurocognitivos (HAND) entre indivíduos infectados com HIV-1

Processo: 20/09887-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2020
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2022
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Jorge Simao do Rosario Casseb
Beneficiário:Pedro Domingos Leite Junior
Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/07239-2 - Incidência, fatores de risco, mecanismos patogênicos e prevenção de distúrbios neurocognitivos (HAND) entre indivíduos infectados com HIV-1, AP.TEM
Assunto(s):Virologia   Infectologia   Vírus linfotrópico T tipo 1 humano   HIV-1   Transtornos neurocognitivos   Biomarcadores   Fatores de risco
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Hand | marcadores | Infectologia

Resumo

Objetivo específico 3: Avaliar correlatos imunológicos e virológicos de indivíduos infectados pelo HTLV-1. HIPÓTESE O Vírus Linfotrópico de Células T Humana Tipo 1 (HTLV-1), o primeiro retrovírus humano descrito, é o agente causador de uma Leucemia/Linfoma de células T geralmente fatal e uma paraplegia progressiva, denominada mielopatia associada ao HTLV-1 (HAM / TSP) (1, 2). Há pelo menos 5-10 milhões de pessoas infectadas no mundo, quase um milhão no Brasil (3), no entanto, apenas 2/3 do mundo foram mapeados para o diagnóstico de infecção pelo HTLV (4). A infecção pelo HTLV-1 é endêmica em várias partes do mundo, incluindo o sudeste do Japão, algumas ilhas do Caribe, América do Sul, África subsaariana e focos no Oriente Médio e Austral-Melanésia (6,8). Uma revisão recente de dados epidemiológicos com base em uma população total de aproximadamente 1,5 milhão de indivíduos residentes em áreas endêmicas do HTLV-1 mas não incluindo outras regiões altamente populosas como China, Índia, África do Noroeste e África Oriental - sugere que provavelmente existam mais que portadores de HTLV-1 do que o relatado até o momento (8). No Brasil, as estimativas apontam para cerca de 1 milhão de pessoas infectadas, tornando-se o país com o maior número absoluto de indivíduos soropositivos (10). A transmissão vertical talvez seja a forma mais importante de contaminação para manutenção desta endemia (6). Objetivo específico 2: Avaliar os correlatos virológicos e imunológicos da disfunção neurológica e cognitiva em indivíduos infectados pelo HIV-1. (2A) Identificar biomarcadores no sangue para indivíduos com distúrbios neurológicos ou comprometimento cognitivo; (2B). Avaliar a ativação imune celular em indivíduos com e sem distúrbios neurológicos ou comprometimento cognitivo devido à HAND; (2C) Determinar marcadores virológicos que podem estar associados a distúrbios neurológicos ou comprometimento cognitivo. Descrição das atividades do bolsista no projeto de pesquisa: Após treinamento, a Bolsista irá desempenhar as seguintes tarefas para processamento das amostras: Coleta e preparo das amostras: As amostras de sangue dos pacientes colhidas por punção venosa e as identificações realizadas com auxílio de um agente de saúde, colocando-se o nome e o número conforme o prontuário médico em um tubo contendo EDTA K3 (0,054 ml/tubo), com aproximadamente 10 ml de sangue venoso periférico. A bolsista realizará a centrifugação dos tubos a 2500 RPM por 15 minutos. Alíquotas do plasma e soro serão armazenadas à - 80º C para o processamento posterior da triagem sorológica e testes confirmatórios. Também realizará a separação das células mononucleares por gradiente de concentração de Ficoll-Hypaque (Sigma Chemicals, St Louis, MO) e estocadas à -80º C para a realização de testes moleculares. Extração de DNA: As amostras de células mononucleares serão obtidas pela bolsista através de um processo de extração de DNA pelo kit comercialmente disponível (ILLUSTRA Blood Genomic Prep Mim Spin Kit, GE Healthcare, Life Sciences, EUA), de acordo com as instruções do fabricante. O DNA será extraído de células mononucleares do sangue periférico. Serão adicionados 400 ¼l de solução de lise de células sanguíneas e homogeneizados por vortex por 15 segundos. Em seguida será adicionado 20 ¼l de proteinase K em cada amostra será incubada a temperatura ambiente por 10 minutos e após esse período, realizado novamente uma homogeneização por vortex por 10 segundos. (AU)

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