Identificação de pontenciais inibidores de sirtuínas de Leishmania infantum

• Processo: 20/14754-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nilmar Silvio Moretti
• Beneficiário: Artur Honorato Reis
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Protozoologia Descoberta de drogas Leishmaniose Leishmania Clonagem Inibidores Sirtuínas Inibição
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: drug discovery | inibidores | leishmania | Sirtuinas | Biologia Molecular de Leishmania

Resumo

Leishmanioses são causadas por diferentes espécies de Leishmania spp. A doença apresenta espectro clínico variando de lesões cutâneas, mucocutâneas até o acometimento de vísceras. Durante seu ciclo de vida, Leishmania sp. transita entre hospedeiros invertebrados e vertebrados, enfrentando diferentes modificações ambientais, que exigem do parasita rápidas adaptações para sua sobrevivência. Modificações pós-traducionais, como acetilação e fosforilação tem sido implicadas na regulação de diversos processos celulares. Recentemente nosso grupo descreveu o acetiloma das formas promastigotas, metacíclicas e amastigotas de Leishmania mexicana. Foram identificados 336 sítios de lisina diferencialmente acetilados (K-ac) em 253 proteínas na forma promastigota procíclica; 550 K-ac em 304 proteínas na forma promastigota metacíclica, e 349 K-ac em 225 proteínas na forma amastigota. Tendo em vista que a regulação dos níveis de acetilação proteica parece desempenhar papel importante nos mecanismos regulatórios da diferenciação de Leishmania sp. entre suas formas evolutivas, este projeto tem como objetivo explorar o potencial da família de lisina desacetilases, sirtuínas, de L. infantum para identificação/validação de novos inibidores dessas enzimas. Assim, pretendemos: I) clonar os genes LiSir2rp1, LiSir2rp2 e LiSir2rp3 em vetores de expressão proteica em bactérias; II) expressar e purificar as proteínas heterólogas LiSir2rp1, LiSir2rp2 e LiSir2rp3; III) avaliar o efeito da atividade de desacetilação das proteínas LiSir2rp1, LiSir2rp2 e LiSir2rp3 em ensaios in vitro; IV) testar inibidores de sirtuínas em ensaios de inibição de atividade de desacetilação utilizando as proteínas LiSir2rp1, LiSir2rp2 e LiSir2rp3. Desta maneira, esperamos com esse projeto contribuir para validação das sirtuínas como potenciais alvos quimioterápicos para desenvolvimento de novos e mais específicos inibidores das enzimas de L. infantum.