Geração de células-tronco de pluripotência induzida (iPSCs) a partir de células adultas de camelídeos

• Processo: 20/07921-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2021
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fabiana Fernandes Bressan
• Beneficiário: Nayanne Sant Clair Cardoso da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/26818-5 - Investigação de mecanismos celulares e moleculares da aquisição da toti- e pluripotência induzida in vitro - modelo translacional, AP.JP
• Assunto(s): Medicina regenerativa Biologia do desenvolvimento Expressão gênica Células-tronco pluripotentes Alpacas Pluripotência Camelídeos Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alpacas | Células de pluripotência induzida | fibroblastos adultos | Medicina regenerativa | Reprodução Animal | Células de pluripotência induzida

Resumo

Representantes da família Camelidae infraordem Tylopoda, como alpacas, guanacos, vicunhas, lhamas, camelos, dromedários, dentre outros, têm presença marcante em quatro (Américas, Ásia, África, e Austrália) dos sete continentes e apresentam grande importância econômica e social em virtude da capacidade de se adaptarem às condições adversas, típicas das regiões áridas que habitam, visto sua capacidade de submissão a inúmeras tarefas, como por exemplo, transporte, trabalho agrícola, lazer, produção de lã, carne, leite e seus derivados. O presente estudo tem como principal objetivo gerar um maior conhecimento quanto à biologia de desenvolvimento e novas tecnologias nestes animais, e em especial, visando futuramente contribuir para possibilidades na preservação das espécies, tendo em vista a ameaça de extinção de alguns camelídeos em estado selvagem, como as vicunhas (quase dizimadas por caçadores ilegais) e os camelos. Para tal, tendo em vista o papel das células tronco para promoção de maior eficiência reprodutiva e possibilidade de terapias inovadoras, neste estudo buscamos, de forma inédita, a produção e caracterização de células-tronco de pluripotência induzida (iPSC), ou seja, reprogramar in vitro células adultas a um estado pluripotente, similar ao embrionário, em camelídeos. Para isso, utilizaremos fibroblastos da espécie Vicugna pacos obtidos através de biópsias em parcerias, os quais serão isolados, cultivados, e transduzidos com vetores lentivirais policistrônicos que expressam OCT4, SOX2, KLF4 e c-MYC humanos ou murinos (hOSKM ou mOSKM). É esperado que o estudo apresente eficiência comprovada quanto à diferenciação em iPSCs mediante aos testes de: detecção da fosfatase alcalina e imunocitoquímica para proteínas de pluripotência OCT4, SOX2 e NANOG, formação dos corpos embrióides e diferenciação in vitro, seguido de análise da expressão de genes relacionados à pluripotência e ensaio de teratoma. A presente proposta mostra-se relevante tanto como modelo para estudo de doenças, desenvolvimento de novos fármacos e inúmeras ações e inovações terapêuticas, quanto para impulsionar tecnologias reprodutivas avançadas, como a possibilidade de geração de embriões e gametas in vitro, representando um importante papel na preservação das espécies.