Caracterização do sistema de defesa antioxidante GarAB de Chromobacterium violaceum

• Processo: 21/01440-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: José Freire da Silva Neto
• Beneficiário: Graziela Garcia Lopes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Genética molecular Etiologia Estresse oxidativo Expressão gênica Virulência In vivo Chromobacterium violaceum Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chromobacterium violaceum | Estresse oxidativo | glutationa amida | peroxidase híbrida | sistemas antioxidantes | virulencia bacteriana | Sistemas antioxidantes em bactérias

Resumo

Os sistemas antioxidantes enzimáticos são fundamentais para a sobrevivência dos organismos aeróbios. Em bactérias, estes sistemas conferem proteção contra as espécies reativas de oxigênio (ROS) geradas de modo endógeno ou de fontes externas ambientais e do hospedeiro. Neste projeto, iremos caracterizar in vivo, na bactéria anaeróbia facultativa e patógeno ambiental Chromobacterium violaceum, um sistema antioxidante ainda pouco estudado, descrito apenas em bactérias púrpuras anaeróbias. Nestas bactérias, este sistema é formado pela peroxidase híbrida (Prx/Grx) GarA e a glutationa amida redutase (GAR) GarB, que atuam utilizando o tiol de baixo peso molecular glutationa amida (GASH) e NADH para reduzir peróxidos in vitro. Dados preliminares do nosso grupo indicam que os genes garAB são induzidos na presença de hidroperóxido de cumeno em C. violaceum. Para caracterizar este sistema in vivo em C. violaceum serão geradas linhagens mutantes com deleção dos genes garAB, além das respectivas linhagens complementadas. Ensaios fenotípicos na presença de diversos oxidantes e ensaios de virulência em camundongos utilizando estas linhagens mutantes, além de ensaios de expressão gênica deverão revelar se o sistema GarAB é importante para C. violaceum se defender de ROS advindos de diferentes fontes. Os dados obtidos neste projeto deverão contribuir para revelar a importância do sistema GarAB em bactérias aeróbias e se este sistema atua na patogênese de C. violaceum.