Aplicação de peptídeos recombinantes selecionados por phage display como plataformas de biorreconhecimento em ensaios de fluxo lateral para o diagnóstico de câncer de mama

• Processo: 21/12307-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2022
• Data de Término da vigência: 20 de março de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
• Pesquisador responsável: Maria Del Pilar Taboada Sotomayor
• Beneficiário: Rafael da Fonseca Alves
• Supervisor: Maria Isabel Pividori
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), Espanha
• Vinculado à bolsa: 19/10452-2 - Desenvolvimento de biossensor eletroquímico e dispositivo de fluxo lateral, low cost para detecção de biomarcadores neoplásicos, BP.DR
• Assunto(s): Neoplasias mamárias Diagnóstico Testes imediatos Nanopartículas de ouro Phage display
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | Diagnóstico rápido | ensaio de fluxo lateral | nanoparticulas de ouro | Peptídeos ligantes | phage display | Desenvolvimento de teste de diagnóstico

Resumo

O câncer de mama (CM), no Brasil, é o mais frequente entre as mulheres, depois do câncer de pele não melanoma. A origem da doença é complexa e envolve diversos fatores de risco, incluindo ambientais, biológicos e hereditários. A detecção precoce é crítica para um tratamento eficaz; entretanto, as estratégias diagnósticas atuais são limitadas. Assim, a busca por métodos mais precisos e sensíveis tornou-se o ponto de partida para diferentes abordagens científicas. A técnica de Phage Display permite a seleção de peptídeos recombinantes específicos para os mais diversos alvos moleculares, fornecendo moléculas versáteis. Em um estudo anterior, foi possível selecionar dois peptídeos chamados C3 e H2 que se ligam à superfície das células tumorais de mama. Os peptídeos selecionados, além de possuírem alta afinidade, pureza e baixo custo, podem ser utilizados no desenvolvimento de imunoensaios. Nesse sentido, este projeto visa caracterizar o perfil de reconhecimento desses peptídeos às proteínas do tumor mamário através do método de fluxo lateral. Para isso, o extrato de citoplasma e proteínas de membrana da linhagem mamária MCF-10A serão utilizados como controle negativo (não tumorigênico) e as linhas de tumor mamário MCF-7 (tumor com fenótipo luminal) e MDA-MB123 (tumor com fenótipo triplo-negativo) como controles positivos. Além disso, visando reduzir os custos de produção desse dispositivo analítico, nanopartículas de ouro serão sintetizadas e modificadas com estreptavidina, que será utilizada para interagir com os peptídeos para gerar a resposta colorimétrica. Após validação inicial, e otimização dos parâmetros de construção e análise, espera-se que os peptídeos C3 e H2 sejam eficientes na diferenciação das cepas, em ensaios de fluxo lateral. (AU)