Efeitos da molécula 3-oxo-C12-HSL de detecção de quorum de Pseudomonas aeruginosa na ativação de células T em organoides 3D de células epiteliais pulmonares

• Processo: 21/11012-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 03 de outubro de 2022
• Data de Término da vigência: 02 de outubro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Niels Olsen Saraiva Câmara
• Beneficiário: Marcella Cipelli
• Supervisor: Matthias Lochner
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Hannover Medical School, Alemanha
• Vinculado à bolsa: 18/24350-4 - Caracterização metabólica da população de células T Foxp3+ RORgt+ no modelo experimental de Câncer colorretal associado à Colite, BP.DD
• Assunto(s): Infecção Virulência Fibrose cística Progressão da doença Linfócitos T Pseudomonas aeruginosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cystic Fibrosis | Lung organoids | molecule 3-oxo-C12-HSL | Pseudomonas aeruginosa | Mucosal Infection

Resumo

A infecção por Pseudomonas aeruginosa em pacientes com fibrose cística (FC) está associada à progressão e morbidade da doença. Um importante fator de patogenicidade é a produção da molécula quorum sensing 3-oxo-C12-HSL, que se mostrou prejudicial à integridade da barreira celular epitelial, bem como ao metabolismo. Nos últimos anos, percebeu-se a importância das células T de memória residentes no tecido nas infecções pulmonares. Essas células exibem uma variedade de receptores inibitórios, ao mesmo tempo em que demonstraram desenvolver fortes respostas imunológicas na reativação. Em pacientes com FC, um estado hiperinflamatório e uma resposta de células T com tendência a células Th17 são encontrados. Nossa hipótese é que o 3-oxo-C12-HSL prejudica a expressão de moléculas de sinalização inibitórias em células epiteliais e aumenta os estímulos de ativação, levando a uma reativação aumentada do TRM. Faremos análises de FACS e microscopia de células epiteliais cultivadas em estruturas organoides de pulmão humano 3D, estabelecidas em laboratório, para analisar a expressão da molécula inibitória PD-L1 de células tratadas com 3-oxo-C12-HSL. Além disso, examinaremos a produção de citocinas e a expressão de MHC. Para confirmar os resultados, iremos co-cultura de células T em organóides murinos e verificar a reativação na presença de 3-oxo-C12-HSL após estimulação de LPS. Compreender o estado hiperinflamatório dos pulmões com FC é de fundamental importância para explorar novos alvos terapêuticos. O bloqueio de substâncias bacterianas associadas a essas respostas imunes seria benéfico, pois os efeitos colaterais podem ser menores em comparação com a influência das células hospedeiras. Esperamos conectar o 3-oxo-C12-HSL com o aumento da reativação de células T e, assim, abrir caminho para novas opções de tratamento em pacientes com FC. *AU)