Avaliação da atividade neutralizante de anticorpos monoclonais antitetânicos em ensaios celulares

• Processo: 22/00205-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Maria Moro
• Beneficiário: Cauã Pacheco de Lima
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/07040-1 - Centro de Pesquisa e Desenvolvimento em Imunobiológicos, AP.NPOP
• Assunto(s): Biotecnologia Anticorpos neutralizantes Anticorpos monoclonais Transdução de sinais Linhagem celular Neurotoxinas Tétano
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cellular signaling | endocytic proteins | human monoclonal antibody | neuronal cell lineages | neutralization assays | tetanus neurotioxin | Biotecnologia

Resumo

O tétano ainda é um problema de saúde mundial grave, refletindo a precarização dos sistemas públicos de saúde em países de baixo desenvolvimento humano. Apesar do esquema vacinal completo contra a doença ser oferecido no Brasil, o Ministério da Saúde divulga por ano centenas de novos casos de Tétano Acidental. Apesar da vacina eficiente, há necessidade de doses de reforço ao longo da vida. Em casos de infecção, é preconizado o uso de soro equino ou humano (imunidade passiva), em associação com a antibioticoterapia. A alternativa ao soro antitetânico por anticorpos monoclonais (mAbs) humanos é promissora e representa uma opção com maior eficácia e segurança. Ensaios in vitro que avaliam o efeito de mAbs antitetânicos incitam futuras profilaxias e novas compreensões sobre a patogênese da doença. Neste projeto, é proposto avaliar o efeito in vitro de mAbs antitetânicos desenvolvidos no Laboratório de Biofármacos. A proposta é utilizar ensaios celulares para avaliar a interação da toxina ao neurônio e sua inibição por mAbs. Para tanto, células Neuro-2a (ou outras de linhagens neuronais) serão incubadas com a neurotoxina tetânica, fragmento C-terminal e neurotoxina recombinante com mutação no domínio da cadeia leve (R372A/Y375F). Será avaliado o efeito da neutralização determinado pelo mapeamento de vias endocíticas, por detecções de vias de sinalização de sinais anti-apoptóticos e análises imunofenotípicas. Espera-se que a neutralização devida à ação individual ou combinada dos mAbs forneça padrões de resposta em consonância com os ensaios in vivo executados anteriormente e possam ser utilizados para avaliar o painel disponível de mAbs antitetânicos. (AU)