Análise da expressão das diferentes formas de miosina no processo de miogênese in vitro em modelos celulares para doenças neuromusculares

• Processo: 22/02649-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Mariz Vainzof
• Beneficiário: Isabela de Aquino Zogbi
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08028-1 - CEGH-CEL - Centro de Estudos do Genoma Humano e de Células-Tronco, AP.CEPID
• Assunto(s): Genética médica Doenças neuromusculares Distrofia muscular de Duchenne Fibras musculares esqueléticas Mioblastos Miosinas Miogênese Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dmd | mioblastos | Miogênese | miotubos | Xmea | Genética Humana

Resumo

O músculo esquelético é composto por fibras musculares que são estruturas multinucleadas e alongadas. Durante a miogênese, as células mononucleadas indiferenciadas, os mioblastos, proliferam e fundem-se, formando os miotubos, células multinucleadas diferenciadas. Nos miotubos maduros, são expressas proteínas como a actina e a miosina, protagonistas na contração muscular. Diferentes formas de miosinas são expressas no músculo esquelético humano, de acordo com o gene que as codifica. A miosina de desenvolvimento e a miosina neonatal são formas de cadeia pesada altamente expressas no início da diferenciação e em processos de regeneração. No músculo maduro, as formas de miosinas rápida e lenta são mais expressas. Em estudo recente do nosso laboratório, verificamos que mioblastos originados de paciente com Miopatia ligada ao X com autofagia excessiva (XMEA) apresentavam uma capacidade fusogênica alta, formando miotubos muito grandes, e que não estava relacionada à desregulação de fatores miogênicos. Entretanto, ainda não foi estudada a expressão e participação das miosinas durante a miogênese na linhagem XMEA e em outras linhagens musculares. Assim, este projeto objetiva estudar o desenvolvimento muscular in vitro, utilizando linhagens de mioblastos de paciente XMEA em comparação a linhagens de indivíduos normais e de pacientes com Distrofia tipo Duchenne (DMD). Será avaliada a expressão das miosinas de cadeia pesada em diferentes estágios de diferenciação, assim como as proteínas atuantes diretamente no processo de fusão dos mioblastos. Além disso, o papel do gene VMA21 na miogênese exacerbada em XMEA será avaliado através do seu silenciamento em linhagens musculares normais.(AU)