Modulação da expressão gênica do nclx

• Processo: 22/03975-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Alicia Juliana Kowaltowski
• Beneficiário: Julia Kühl Teles Martini
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/06970-5 - Transportadores iônicos mitocondriais como sensores e reguladores do metabolismo energético, AP.TEM
• Assunto(s): Cálcio Expressão gênica Mitocôndrias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cálcio | expressão gênica | mitocôndria | Nclx | Atividade do NCLX mitocondrial

Resumo

O Ca2+ mitocondrial desempenha um papel importante tanto do ponto de vista fisiológico como fisiopatológico. Assim, a fim de manter a homeostase do Ca2+, a mitocôndria apresenta transportadores para este íon, sendo que o efluxo de Ca2+ e sua redistribuição são controlados pelo trocador Na+/ Ca2+/ Li+, denominado de NCLX.O NCLX destaca-se em processos da fisiologia celular, como regulação do estado redox da matriz mitocondrial, tendo importância em tecidos e células diferentes, como o tecido adiposo marrom, os neurônios sensoriais, linfócitos B e cardiomiócitos. Além dos estados fisiológicos, o NCLX é um fator de destaque em processos patológicos, como isquemia e reperfusão cardíaca, Doença de Alzheimer, câncer colorretal, dentre outros. Diversos estudos relacionaram essas fisiopatologias a uma modulação negativa da expressão do gene do NCLX, apontando, assim, para o potencial terapêutico e preventivo sobre a regulação deste gene. Porém, ainda não se sabe quais fatores são capazes de modular tal expressão.Assim, o objetivo desse trabalho é explorar a modulação do NCLX por fatores de estresse celular - a tapsigargina, o peróxido de hidrogênio e a soroprivação - em 3 níveis - mRNA, síntese proteica e atividade. Para alcançar tais objetivos, o método experimental proposto envolve cultivar células e expô-las a cada um dos fatores de estresse, avaliando as alterações pelas técnicas de RT-qPCR para analisar o mRNA, Western Blotting para avaliar a quantidade de proteína e permeabilização de células para verificar a atividade de efluxo de Ca2+ mitocondrial estimulada por Na+. Desse modo, esse trabalho visa contribuir para um maior entendimento da modulação do gene do NCLX.