Abordagens multi-ômicas e metabolômica em fluxo para o estudo da colestase intra-hepática familiar progressiva tipo 3 (PFIC3) em linha celular HepG2

• Processo: 22/01102-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química
• Pesquisador responsável: Antonio Gilberto Ferreira
• Beneficiário: Juliana Magalhães de Oliveira
• Supervisor: Stefan Kempa
• Instituição Sede: Centro de Ciências Exatas e de Tecnologia (CCET). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Max Planck Society, Berlin, Alemanha
• Vinculado à bolsa: 19/15040-4 - Estratégias ômicas na investigação de biomarcadores para diagnóstico precoce de pacientes com doenças biliares progressivas, BP.DR
• Assunto(s): Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Proteômica Metabolômica Colestase Metabolismo dos lipídeos Metabolismo hepático
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cass9 - MDR3 | Cell lines HepG2 | Crispr | Flux Metabolomics | lipidomics | Progressive Familial Intrahepatic Cholestasis type 3 (PFIC-3) | Proteomics | Metabolômica

Resumo

A proteína associada à membrana codificada pelo gene ABCB4 é um membro da superfamília de transportadores de cassete de ligação de ATP (ABC). As proteínas ABC transportam várias moléculas através das membranas extra e intracelulares. As doenças associadas ao ABCB4 incluem a Colestase Intra-hepática Familiar Progressiva tipo 3 (PFIC3) e Doença da Vesícula Biliar. Entre suas vias relacionadas estão a regulação do metabolismo lipídico pelo receptor alfa ativado por proliferador de peroxissoma (PPARalfa) e transportadores hepáticos ABC. Os genes ABC são divididos em sete subfamílias distintas (ABC1, MDR/TAP, MRP, ALD, OABP, GCN20, White). Esta proteína é um membro da subfamília MDR/TAP, que está envolvida na multirresistência, bem como na apresentação de antígenos. Este gene codifica um transportador e membro da família de glicoproteínas-p de membranas protéicas com fosfatidilcolina como substrato. A função desta proteína ainda não foi completamente elucidada; entretanto, pode envolver o transporte de fosfolipídios dos hepatócitos do fígado para a bile. O splicing alternativo deste gene resulta em vários produtos de função indeterminada. Mutações no gene ABCB4 levam à disfunção da MDR3, que está relacionada à ausência de fosfolipídios biliares resultando em diminuição do transporte (fluxo) e deficiência na excreção de sais biliares, bem como em danos ao epitélio biliar e canalicular biliar, levando à colestase. No entanto, o mecanismo molecular do MDR3 nas células hepáticas ainda é pouco compreendido. Portanto, o metabolismo hepático pode ser investigado usando abordagens ômicas por análises metabolômicas, lipidômicas e proteômicas. Além disso, o fluxo metabólico em hepatócitos humanos pode fornecer uma visão abrangente da distribuição de metabólitos intracelulares e novos insights na caracterização de alterações metabólicas intrínsecas no fígado causadas pela inativação de MDR3. A distribuição do fluxo metabólico é utilizada para caracterizar a topologia da rede através da metabolômica resolvida por isótopos estáveis (SIRM). Nesse contexto, modelos metabólicos hepáticos, estudos metabólicos, lipidômicos e proteômicos associados podem trazer novas alternativas para o tratamento e diagnóstico de pacientes com colestase hepática. (AU)