Caracterização funcional in vitro de microRNAs na toxoplasmose

• Processo: 22/01475-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
• Pesquisador responsável: Cristina da Silva Meira Strejevitch
• Beneficiário: Tamires Santos de Arruda
• Instituição Sede: Instituto Adolfo Lutz (IAL). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Citocinas Expressão gênica MicroRNAs Resposta imune Toxoplasma gondii Toxoplasmose Parasitologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: citocinas | expressão gênica | miRNA | resposta imune | Toxoplasma gondii | toxoplasmose | Parasitologia

Resumo

Estudos recentes mostram que os microRNAs (miRNAs), pequenas moléculas que exercem importante papel na regulação da expressão gênica em células de eucariontes são capazes de regular negativamente o processamento, estabilidade e tradução de diversos RNAs mensageiros alvos para a produção de citocinas. Entretanto, os mecanismos regulatórios envolvidos durante a infecção por Toxoplasma gondii ainda permanecem desconhecidos. Achados prévios do nosso grupo sobre a caracterização da resposta imune em pacientes com toxoplasmose sintomática (ocular, cerebral e congênita) identificaram potenciais miRNAs que poderiam estar envolvidos na regulação da produção de importantes citocinas para o controle da infecção. Tais miRNAs estão sendo submetidos à análises in silico e seus alvos preditos estão sendo determinados. Desta forma, o presente projeto consiste em realizar a caracterização funcional in vitro destes miRNAs através de ensaios de super-expressão e silenciamento afim de validar os achados obtidos das análise in silico e confirmar os potenciais efeitos dos miRNAs sob seus alvos. Ainda, pretendemos mensurar seus efeitos nos processos celulares e seu impacto na produção de citocinas importantes para o controle da infecção. Os experimentos serão conduzidos mediante infecção de macrófagos humanos da linhagem THP-1 por T. gondii e as análises de expressão gênica serão realizadas por PCR em tempo real. Acreditamos que a investigação do desempenho destas moléculas na regulação do sistema imune é oportuna e relevante. A correlação dos miRNA e o perfil da resposta de expressão gênica de citocinas amplia o entendimento da relação molecular que se estabelece entre hospedeiro e parasita durante a infecção. Estes ensaios são de extrema importância para a continuidade de um projeto maior no qual pretendemos estudar o papel dos miRNAs na toxoplasmose sintomática. Além disso, estes achados poderão fornecer informações sobre este importante mecanismo de silenciamento gênico na toxoplasmose além do aprendizado e enriquecimento científico que este projeto proporcionará. (AU)