Avaliação da precipitação como técnica de recuperação e purificação de anticorpos policlonais anti-IgM humana a partir de soro de coelhos

• Processo: 22/15751-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2023
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Operações Industriais e Equipamentos para Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Igor Tadeu Lazzarotto Bresolin
• Beneficiário: Caio Nadalucci Almeida
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/12552-1 - Precipitação como método de purificação de anticorpos monoclonais e policlonais: determinação de parâmetros termodinâmicos e de processo, AP.R
• Assunto(s): Anticorpos Processamento downstream Precipitação Purificação de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | Downstream Processing | precipitação | Purificação de proteínas

Resumo

Este plano de trabalho de treinamento técnico visa a determinação do perfil proteico do soro de coelhos, com ênfase na concentração do anticorpo policlonal (pAb) anti-IgM humana. Posteriormente, serão determinadas as curvas de solubilidade do pAb anti-IgM com os agentes precipitantes PEG (4000 e 6000) variando sua concentração de 1% a 16% (m/v), cloreto de zinco (0 a 12 mmol L-1), e a combinação de ambos, utilizando tampões com pH 6,0, 7,0, 8,0 e 9,0. O teor de contaminantes e o perfil proteico serão levantados por HPLC. Um dos potenciais riscos é a ocorrência de coprecipitação de outras imunoglobulinas presentes no soro, que será monitorada e avaliada. Por fim, serão realizadas precipitações em batelada nas condições experimentais mais promissoras obtidas com as curvas de solubilidade, seguida de determinação das melhores condições de ressuspensão para os precipitados (otimizações de tampão, com variação de pH entre 3,5 e 8,0 e proporção de diluição) e de sua viscosidade dinâmica, para definição das melhores condições de processo.