Caracterização in silico do complexo E3 ubiquitina-ligases do tipo CRL1 (Cullin RING-ligases) em Leishmania infantum

• Processo: 22/16270-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Felipe Roberti Teixeira
• Beneficiário: Caroline Torres
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania infantum Via da ubiquitina-proteassoma Protozoologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cullin RING-ligases | leishmania infantum | Sistema Ubiquitina-Proteassoma | Protozoologia

Resumo

O sistema ubiquitina proteassoma (SUP) é o principal responsável pela proteólise intracelular em eucariotos. A ubiquitinação ocorre pela ação das enzimas E1 (enzima ativadora de ubiquitina), E2 (enzima carreadora de ubiquitina) e E3 (ubiquitina-ligases), essenciais no reconhecimento e transferência da ubiquitina para proteína alvo. Estas podem ser direcionadas ao proteassoma para degradação ou terem suas funções reguladas. Protozoários parasitas que realizam alternância de hospedeiros em seus ciclos de vida têm proteólise intracelular como processo essencial para o sucesso do parasitismo. Pouco se sabe sobre o SUP em muitos parasitos, incluindo os tripanossomatídeos do gênero Leishmania, responsáveis por causarem as leishmanioses. No Brasil, a espécie Leishmania infantum é o agente etiológico da leishmaniose visceral (LV) a forma mais grave da doença, podendo ser fatal se não tratada. O proteassoma de Leishmania possui subunidades com alto grau de identidade ao de humanos, e vem sendo alvo de drogas para tratamento de leishmanioses. Recentemente, foram caracterizadas as enzimas E1, E2 e deubiquitinases de Leishmania mexicana, demonstrando o papel essencial na proliferação e infectividade dessa espécie. Entretanto, as E3 ubiquitina-ligases de Leishmania permanecem pouco estudadas. O presente projeto propõe análises in silico para caracterização estrutural e filogenética dos genes, LINF_110018100, LINF_210005300, LINF_24002910 e LINF_240015400, ortólogos aos genes humanos SKP1, RBX1, CUL1 e F-box like Protein- FBP respectivamente. Estes são componentes da maior e mais bem estudada classe de E3 ubiquitina-ligases em humanos, as Cullin RING-ligases (CRLs) ou SCF1. Resultados prévios do AR-FAPESP vigente (2020/15771-6) pelo nosso grupo demonstraram que existe o complexo CRL em L.infantum e as interações entre seus componentes foram validadas por ensaios em modelos celulares de mamíferos. No entanto, estudos de modelagem estrutural e análises filogenéticas destes genes não foram desenvolvidas. Este projeto visa preencher esta lacuna no AR-FAPESP e contribuirá para caracterização destes genes do parasita em nível estrutural e filogenético.