Isolamento, identificação e validação de novos alvos tubulares renais das gliflozinas

• Processo: 23/00268-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
• Pesquisador responsável: Adriana Castello Costa Girardi
• Beneficiário: Andréia Boaro
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/14534-3 - Efeitos pleiotrópicos de agentes antidiabéticos e de seus alvos farmacológicos: mecanismos renoprotetores para além do controle glicêmico, AP.TEM
• Assunto(s): Rim
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cromatografia de imunoafinidade | gliflozinas | química do clique | Rim | Síntese orgânica e química medicinal

Resumo

As gliflozinas, além de se mostrarem eficazes no tratamento do diabetes mellitus tipo 2 (DM2), vêm demostrando melhoras significativas em quadros de insuficiência cardíaca (IC) e doença renal crônica DRC. No entanto, os benefícios clínicos reportados não podem ser explicados apenas pela inibição do SGLT2 em túbulo proximal renal. Neste projeto,pretende-se isolar e identificar alvos tubulares renais das gliflozinas para além do SGLT2. Para tal, utilizaremos síntese química combinada à cromatografia de imunoafinidade e espectrometria de massa. Inicialmente desenvolveremos sondas químicas constituídas pela molécula de empagliflozina ligada à sequência peptídica FLAG (DYKDDDDK), intercalada por espaçadores (linkers), como por exemplo: 3XFlag (DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK), hexaglicina ou pentadecaglicina. Esses espaçadores serão avaliados quanto àsolubilidade, distância e interações não específicas. Em seguida, a sonda empagliflozinalinker-FLAG será incubada com extrato de proteínas de membrana de rim de rato e passadas através de coluna contendo anti-FLAG. O eluato será então submetido à espectrometria demassa para identificação de potenciais alvos. Os dados obtidos por meio deste projeto poderão fornecer maior compreensão dos mecanismos de ação dos benefícios renais das gliflozinas no DM2, IC e DRC.