Otimizar sistema de obtenção do Fator de Crescimento de Fibroblastos 2 humanizado (FGF-2h) com alto rendimento utilizando E.coli

• Processo: 22/16419-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcelo Ferreira Marcondes Machado
• Beneficiário: Matheus Lucena Galhardo
• Instituição Sede: Instituto Nacional de Farmacologia (INFAR). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Anticorpos monoclonais Biotecnologia Imunologia Nanocorpos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpo monoclonal | biotecnologia | Imunologia | Nanocorpos | biotecnologia

Resumo

O Fator de Crescimento de Fibroblastos 2 (FGF-2 ou bFGF) é um protótipo derivado da família FGF, que por sua vez, está envolvido na expansão e desenvolvimento tumoral. Na literatura, há vários relatos de seu envolvimento com o melanoma, devido grande expressão pelas células malignas, progressão da doença e mau prognóstico. Por outro lado, um anticorpo monoclonal (mAb) anti- FGF-2 nomeado de 3F12E7, desenvolvido colaboradores do grupo de imunologia da Dra. Jane Zveiter de Moraes, demonstrou alto reconhecimento antigênico por FGF-2, quando referido ao crescimento do tumor e aparecimento de metástases recorrentes do melanoma. Nosso grupo de pesquisa atualmente desenvolve um projeto para a síntese de nanocorpos baseados em mAbs conhecido, importando para as regiões de reconhecimento (CDR´s) as sequências de aminoácidos de mAbs caracterizados. A síntese será realizada partir da técnica de PCR de sobreposição (OE-PCR) de oligonucleotídeos, dentre os nanocorpos a serem desenvolvidos temos um que as informações bioquímicas dos CDR´s estão sendo importadas da sequência da VHH do mAB 3F12E7. O presente projeto visa a obtenção de FGF-2h, por síntese do gene otimizado para expressão com alto rendimento em sistema de expressão utilizando E. Coli, através de OE-PCR. Esperamos criar sistema de com alto rendimento de expressão para FGF-2h estável, posto que, as moléculas de FGF-2h disponíveis no mercado apresentam altas taxas de instabilidade devido perda rápida de sua estrutura proteica.