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QUANTIFICAÇÃO DE MICA e MICB DE MEMBRANA EM INDIVÍDUOS COM GENÓTIPOS PREVIAMENTE SELECIONADOS

Processo: 23/01916-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
Data de Término da vigência: 31 de maio de 2024
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
Pesquisador responsável:Camila Ferreira Bannwart Castro
Beneficiário:Luise Alves Tini
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Citometria de fluxo   Mica   Monócitos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Citometria de fluxo | Mica | Micb | monócitos | complexo do MHC

Resumo

As moléculas MICA e MICB são expressas constitutivamente em fibroblastos, monócitos ecélulas epiteliais, no entanto, sua expressão é estimulada em condições como o câncer,infecções e doenças autoimunes, agindo como marcador de estresse celular. Os genes MICAe MICB estão codificados no cromossomo 6 na região do Complexo Principal deHistocompatibilidade (MHC), a região mais variável do genoma humano. Variantes dessesgenes parecem estar associadas a um perfil diferencial de expressão das moléculas nasuperfície das células e à liberação de moléculas solúveis, modulando o sistema imunológicoao interagir com o receptor NKG2D, presente em células natural killer e subpopulações delinfócitos T. Esse projeto visa avaliar a presença molecular de MICA e MICB de membrana emindivíduos saudáveis, previamente selecionados de acordo com o haplótipo, em célulasmononucleares, em situações fisiológicas e após estímulo. Para isso, selecionaremos amostrascom um perfil genético característico após sequenciamento por NGS (e.g., portadoras devariantes não sinônimas), para realização de cultura de células mononucleares. Em seguida,quantificaremos a expressão de MICA e MICB através proteínas de superfície, antes e apósestímulo com peróxido de hidrogênio ou LPS. Os dados serão correlacionados com o perfilgenético das amostras (obtido em etapas anteriores). Demonstrar a heterogeneidade deexpressão dessas moléculas na superfície celular de acordo com o haplótipo encontrado podeservir de base para compreender a dinâmica entre as moléculas MICA e MICB em diversassituações patológicas ou transplantes, além de auxiliar em estudos de associações comdoenças.

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