Seleção por phage display de anticorpos humanos recombinantes não-glicosilados contra os pontos de controle imunológico TIM-3, PD-1 e LAG-3, e sua caracterização como moléculas terapêuticas antitumorais e antivirais

• Processo: 23/01816-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2027
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
• Pesquisador responsável: Daniela Luz Hessel da Cunha
• Beneficiário: Gabriel Correia Lima
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/01723-0 - Isolamento de anticorpos anti-TIM3 a partir de bibliotecas combinatórias expressas no citoplasma de Escherichia coli, BE.EP.DD
• Assunto(s): Imunologia Anticorpos Imunoterapia Viroses Biotecnologia Neoplasias Checkpoint imunológico Phage display
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | biotecnologia | câncer | Immunecheckpoints | imunoterapia | Infecções Virais | Imunologia Aplicada

Resumo

Pontos de controle imunológico são receptores de regulação negativos expressos nas células imunes e sob condições fisiológicas normais, serve de freios para o sistema imunológico, mantendo a auto tolerância e prevenindo danos aos tecidos. Entretanto, essas moléculas também participam de mecanismos de escape ao sistema imune, causando disfunções nas populações de células T em uma variedade de doenças como câncer e infecções virais, incluindo a causada pelo vírus SARS-CoV-2. O bloqueio destes receptores inibitórios com anticorpos monoclonais é utilizado em terapias que almejam resgatar a atividade de células efetoras cronicamente exauridas, a fim de restabelecer a resposta do sistema imune. Atualmente, existem seis pontos de controle imunes envolvidos com infecção viral e com histórico para imunoterapia antitumoral, entre eles, destacam-se PD-1, LAG-3 e TIM-3. Neste contexto, este projeto propõe a obtenção e caracterização de anticorpos monoclonais recombinantes contra bloqueadores dos pontos de controle imunológico PD-1, TIM-3 e LAG-3, a partir de seleção por phage display, utilizando uma biblioteca de anticorpos humana sintética, e sua posterior expressão procariótica em linhagem de E. coli SHuffle, geneticamente adaptada para expressão citoplasmática de anticorpos monoclonais não-glicosilados. Após caracterizados quanto sua sensibilidade e especificidade, tais anticorpos serão testados sozinhos ou em conjunto, como alternativas terapêuticas de ativação de linfócitos T em doenças como câncer e infecções virais crônicas como a COVID-19 longa. O perfil transcriptômico de células efetoras utilizadas em ensaios funcionais será utilizado para a escolha de anticorpos candidatos com maior capacidade de impedir o desenvolvimento de resistência dos pacientes e induzir citotoxicidade a linhagens tumorais. A inovação em produzir anticorpos em bactérias, abre novas possibilidades terapêuticas. Esta proposta já se encontra em andamento na forma de projeto de mestrado (FAPESP n 2021/04307-0) e devido a sua capacidade inovadora e dos resultados preliminares promissores obtidos, foi expandida e está sendo apresentada como projeto de Doutorado Direto. (AU)