Clonagem de fragmentos Fab de anticorpos em células de mamífero

• Processo: 23/08450-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Maria Moro
• Beneficiário: Renan Sampaio Palhares
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/07040-1 - Centro de Pesquisa e Desenvolvimento em Imunobiológicos, AP.NPOP
• Assunto(s): Clonagem Cromatografia de afinidade Anticorpos monoclonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: clonagem | Co-transfecção | cromatografia de afinidade | fragmento Fab | ponte dissulfeto | região variável | Anticorpos Monoclonais

Resumo

O Laboratório de Biofármacos tem tradição na descoberta, desenvolvimento e caracterização de anticorpos monoclonais com potencial terapêutico para doenças infecciosas. Recentemente o laboratório produziu e caracterizou uma variedade de anticorpos humanos antitetânico e anti-Sars-Cov-2 em seu formato integral, ou seja, IgG completa. Observou-se, no entanto, a necessidade de produzir e estudar fragmentos de anticorpos, como o fragmento que se liga ao antígeno (Fab), uma vez que estas moléculas mantém a capacidade de reconhecimento do antígeno sem a ativação de mecanismos efetores dependentes do fragmento Fc. A produção de fragmentos como Fab é interessante também para estudos mais aprofundados sobre a estrutura do complexo antígeno-anticorpo, como cristalografia e microscopia eletrônica criogênica. Este projeto visa a clonagem dos genes codificantes dos domínios variáveis de anticorpos que já foram produzidos em sua forma integral e sua posterior expressão em células de mamífero, como linhagens derivadas de HEK293 ou CHO.