Impacto do silenciamento do lncRNA MIR31HG na modulação do fenótipo osteoblástico: regulação epigenética de células mesenquimais do ligamento periodontal

• Processo: 22/13949-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2023
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Denise Carleto Andia
• Beneficiário: Taís Browne de Miranda
• Instituição Sede: Vice-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação. Universidade Paulista (UNIP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Epigenômica Células-tronco mesenquimais Ligamento periodontal Células-tronco do ligamento periodontal Osso e ossos lncRNAs Análise de sequência de RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células mesenquimais | epigenética | Osso | Epigenética

Resumo

As células derivadas do ligamento periodontal (PDLCs) possuem característica de células mesenquimais e, de acordo com a literatura, há uma heterogeneidade na capacidade de formação de matriz mineralizada extracelular. Porém, estudos publicados do nosso grupo de pesquisa apontam que essa heterogeneidade está relacionada ao perfil epigenético e transcricional distintos, o que pode pré- determinar um dado fenótipo celular. Portanto, os perfis epigenético e transcricional estão fortemente relacionados à aquisição de um fenótipo osteoblástico específico. Os RNAs longos não codificantes (lncRNA), participam da regulação epigenética pela ligação a proteínas regulatórias da cromatina e podem estar envolvidos na modulação de genes osteogênicos. O lncRNA MIR31HG foi escolhido como alvo deste projeto, a partir de análises de bioinformática de dados epigenômicos gerados no último Auxílio (FAPESP/Universidade de Birmingham, UK 2017/07944-5) e nossa hipótese é que ele esteja associado à capacidade reduzida de formação de matriz mineral. Dessa forma, o papel do lncRNA MIR31HG será investigado na regulação epigenética em PDLCs com baixa capacidade de produzir matriz mineral, imortalizadas e editadas por Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/associated nuclease Cas9 (CRISPR-Cas9). O efeito do silenciamento do lncRNA MIR31HG será investigado na formação de matriz mineral in vitro e na relação com o complexo repressivo Polycomb 2 (PRC2), na marca epigenética H3K27me3 e em marcadores osteogênicos, por imunoprecipitação de cromatina, seguida de sequenciamento (ChIP-seq) e níveis proteicos (WB ou MagPix). Os mecanismos epigenéticos são plásticos e reversíveis, podendo ser alternativas promissoras para terapias baseadas em células ou biomoléculas funcionalizando superfícies de implantes ou biomateriais, para o tratamento de diversos defeitos ósseos. (AU)