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Papel da osteoprotegerina na modulação in vitro de monócitos por células de papila apical

Processo: 22/14686-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
Data de Término da vigência: 30 de abril de 2028
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Carla Renata Sipert
Beneficiário:Letícia Martins Santos
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Biologia oral   Osteoprotegerina   Metabolismo ósseo   Monócitos   Papila dentária   Inflamação
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Células de papila apical | Metabolismo Ósseo | osteoprotegerina | Biologia Oral

Resumo

Reabsorção de tecidos mineralizados é um evento biológico presente em patologias orais desafiadoras como doença periodontal, periodontite apical e reabsorção radicular externa. O papel de células mesenquimais na modulação do metabolismo ósseo já é conhecido, mas não o papel de células da papila apical neste contexto especialmente por meio do efeito de osteprotegerina (OPG). O objetivo deste estudo é investigar o papel da OPG produzida por SCAP na modulação da apoptose e diferenciação de monócitos por meio sua ligação com TRAIL e/ou RANKL, sob condição inflamatória. SCAP serão pré-ativadas com lipopolissacarídeo de Escherichia coli, e então plaqueadas. As células serão submetidas à análise da expressão gênica de OPG, TRAIL e RANKL por RT-qPCR e o sobrenadante será coletado para a detecção dos fatores OPG, TRAIL, IL-33 e RANKL por ELISA. Com base nestes achados, serão preparados meios condicionados com anticorpo neutralizante para OPG. Monócitos de sangue periférico serão isolados e colocados em cultura. Eles serão tratados com os meios condicionados de SCAP-anti-OPG ou SCAP, ambos coletados das células pré-ativadas ou controle, e serão investigados quanto à viabilidade celular e apoptose na presença ou não de anticorposneutralizadores de TRAIL e IL-33. A seguir, os monócitos serão induzidos à diferenciação em osteoclastos com adição de M-CSF e RANKL na presença dos meios condicionados por 21 dias. A avaliação da diferenciação em osteoclastos será feita por meio da análise de anéis de actina, detecção de fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e catepsina K. A co-cultura deSCAP e monócitos será estabelecida para avaliar a capacidade de SCAP em modular a osteoclastogênese por meio de RANKL presente na membrana celular. Os dados serão analisados estatisticamente. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SANTOS, LETICIA MARTINS; SIPERT, CARLA RENATA; DOS SANTOS, GABRIEL SOARES; DOS SANTOS, GABRIELLA SOARES; DIONISIO, THIAGO JOSE; DOS SANTOS, CARLOS FERREIRA; DE SOUZA, DOUGLAS NESADAL; NOGUEIRA, FERNANDO NEVES. Protective effect of bisabolol on glucose metabolism in salivary gland of male diabetic rats. ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY, v. 174, p. 9-pg., . (20/12726-0, 15/03965-2, 19/14556-7, 22/14686-0)
LETÍCIA MARTINS SANTOS; DANIELLE YUMI SHIMABUKO; CARLA RENATA SIPERT. Dimethyl sulfoxide affects the viability and mineralization activity of apical papilla cells in vitro. Brazilian Dental Journal, v. 35, . (22/14686-0, 20/12726-0)
ALEXANDRE GUIMARÃES DOS SANTOS; KAROLLYNE SANTOS SPIGARIOL; LETÍCIA MARTINS SANTOS; MARINELLA HOLZHAUSEN; CARLA RENATA SIPERT. Immunomodulatory effects of apical papilla cells on periodontal ligament fibroblasts stimulated with Escherichia coli lipopolysaccharide: an in vitro study. Journal of Applied Oral Science, v. 33, . (22/14686-0, 20/12726-0)