Efeito da deficiência de TBCK, responsável pela Síndrome Neurodegenerativa IHPRF3, sobre o processo de neurodiferenciação

• Processo: 23/02551-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Maria Rita dos Santos e Passos Bueno
• Beneficiário: Igor Cabreira Ramos
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08028-1 - CEGH-CEL - Centro de Estudos do Genoma Humano e de Células-Tronco, AP.CEPID
• Assunto(s): Neurodesenvolvimento Células-tronco pluripotentes induzidas Proteínas quinases Doenças neurodegenerativas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ihprf3 | iPSC | neurodiferenciação | Tbck | Genética do Neurodesenvolvimento

Resumo

TBCK (TBC1 domain-containing kinase) é responsável por codificar uma proteína quinase supostamente associada a transporte de vesículas (via autofágica-lisossômica), crescimento celular, organização do citoesqueleto de actina, regulação da via mTOR a nível transcricional e transporte axonal de RNAm e maquinaria de tradução. Variantes bialélicas do tipo perda de função em TBCK são causativas da síndrome da Hipotonia Congênita com Retardo Psicomotor e Características Faciais do tipo 3 (IHPRF3), cujo quadro clínico pode incluir neurodegeneração e morte precoce. Trabalhos anteriores com fibroblastos e células neurais com variantes em TBCK reportam alterações na via mTOR, no transporte intracelular, na biogênese de autofagossomos, na proliferação e migração celulares. Dados preliminares do nosso laboratório mostram que células neurais TBCK-deficientes apresentam desregulação na expressão de marcadores do neurodesenvolvimento. Nossa hipótese é que a deficiência de TBCK contribui para a desregulação das populações progenitoras, culminando em alterações na neurodiferenciação e nas proporções de populações neurais. Para avaliar como a falta de TBCK afeta a neurodiferenciação, serão utilizadas linhagens controle e com mutações em TBCK induzidas por CRISPR-Cas9. Utilizando cultura 2D e organóides corticais, serão realizados experimentos para avaliar proliferação de progenitores, proporção de diferentes destinos celulares, alterações eletrofisiológicas e genes diferencialmente expressos. A partir destes resultados, esperamos auxiliar na compreensão da função de TBCK e contribuir com a elucidação dos mecanismos moleculares subjacentes a síndromes como a IHPRF3. (AU)