Expressão, purificação e avaliação da arginina quinase da larva infectante de Strongyloides stercoralis e S. venezuelensis como biomarcadores para o sorodiagnóstico da estrongiloidíase humana

• Processo: 23/07417-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Gisele Monteiro
• Beneficiário: William Henry Roldán Gonzáles
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Arginina quinase Biomarcadores Proteínas recombinantes Strongyloides Vacinas Testes sorológicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: arginina quinase | Biomarcador | proteína recombinante | sorodiagnóstico | Strongyloides | Vacina | Biotecnologia

Resumo

A estrongiloidíase humana, causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis é uma doença tropical negligenciada com mais de 600 milhões de pessoas infectadas no mundo inteiro. O diagnóstico tradicional da estrongiloidíase baseado na detecção de larvas do parasito nas fezes do paciente é ineficiente devido à sua baixa sensibilidade, requerendo-se várias amostras fecais para confirmar a suspeita clínica. Por outro lado, a detecção de anticorpos contra os antígenos do Strongyloides pelo teste ELISA é mais sensível e prático, podendo ser utilizado tanto no diagnóstico clínico quanto em inquéritos soroepidemiológicos. No entanto, sua principal desvantagem é a reatividade cruzada com outros tipos de helmintos, sobre tudo em regiões endêmicas de helmintíases, devido à utilização de extratos somáticos do parasito. Recentes estudos do nosso grupo têm observado que os produtos secretados pelas larvas infectantes de S. venezuelensis (a espécie de Strongyloides que infecta roedores e é utilizado como modelo de estudo) contem proteínas antigênicas incluindo uma arginina quinase de 37 kDa (Sv-AK37), identificada mediante análise imunoproteômica, com uma sensibilidade e especificidade de 93 e 100%, respectivamente. Uma análise bioinformática mostrou que Sv-AK37 possui várias regiões antigênicas em comum com seu homólogo presente em S. stercoralis. A possibilidade de utilizar a tecnologia do DNA recombinante para a expressão e produção dessas proteínas antigênicas poderia abrir novos horizontes no estudo da biologia da relação hospedeiro-parasito e na melhoria do sorodiagnóstico da estrongiloidíase humana. Portanto, o objetivo do projeto de pesquisa será expressar, purificar e avaliar a arginina quinase das espécies S. venezuelensis e S. stercoralis como potenciais biomarcadores para o sorodiagnóstico da estrongiloidíase humana pelo teste ELISA, avaliar "in vitro" sua função como ativador da resposta imune inata em macrófagos e seu potencial como possível candidato a vacina. (AU)