Estudo da participação do fator de transcrição TCF7L2 na mediação dos efeitos dos hormônios progesterona e 17²-estradiol sobre a célula ² pancreática na obesidade

• Processo: 23/17143-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Situação: Interrompido
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Silvana Auxiliadora Bordin da Silva
• Beneficiário: Matheus Pedro dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07607-8 - CMPO - Centro Multidisciplinar de Pesquisa em Obesidade e Doenças Associadas, AP.CEPID
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/14178-3 - Efeitos de hormônios esteroides e ácidos graxos na proliferação, secreção de insulina e atividade transcricional de TCF7L2 e FOXO em células beta MIN6 de camundongo e EndoC-bH1 humanas, BE.EP.DR
• Assunto(s): Células secretoras de insulina Obesidade Progesterona Fisiologia endócrina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: célula beta pancreática | obesidade | progesterona | Tcf7L2 | 17beta-estradiol | Fisiologia endócrina

Resumo

A importância do fator de transcrição TCF7L2 sobre a função de células beta é estudada principalmente no diabetes mellitus tipo 2, sendo que seu papel no contexto da adaptação dessas células na gestação ainda é pouco explorado. Dessa forma, o objetivo deste trabalho é avaliar o efeito dos hormônios gestacionais progesterona (P4) e 17beta-estradiol (E2) sobre a adaptação da célula beta via TCF7L2, e a interferência do estresse oxidativo em condições de obesidade sobre esta adaptação. Neste trabalho utilizaremos duas abordagens experimentais: 1) in vitro utilizaremos a linhagem secretora de insulina MIN6, e 2) in vivo utilizaremos um modelo de obesidade induzida pela dieta em camundongos fêmeas C57Bl/6. In vitro, células MIN6 (controle e siRNA.TCF7L2) serão tratadas com palmitato ou meio condicionado de adipócitos isolados e, posteriormente com P4 e E2, para investigar a sobrevivência celular (citometria de fluxo), proliferação celular e estresse oxidativo (espectroscopia de fluorescência), expressão de TCF7L2 pela via PI3K/AKT/GSK3-beta/beta-catenina e FOXO (Western-blot), competição entre TCF7L2 e FOXO pela ligação com beta-catenina (co-imunoprecipitação), expressão gênica (qPCR) e secreção de insulina estimulada por glicose. In vivo, camundongos-fêmeas obesas e não obesas terão peso, consumo de ração e metabolismo glicêmico (GTT e ITT) monitorados, e as ilhotas pancreáticas isoladas serão tratadas com P4 e E2 para avaliar a expressão de TCF7L2 e FOXO. Ao final, esperamos entender melhor o papel de P4 e E2 na adaptação das células beta durante a gestação, e os mecanismos moleculares por onde a obesidade pode prejudicar essa adaptação e contribuir na patogênese do diabetes gestacional (AU)