Mecanismos de percepção de sinais ambientais associados a ativação do Sistema de Secreção do tipo VI de Xanthomonas citri

• Processo: 23/17559-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Cristina Elisa Alvarez Martinez
• Beneficiário: Izabella Santos Mori Bragil
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Xanthomonas citri Genética bacteriana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Mecanismos de sobrevivência | PknS (Ser | Resposta bacteriana | sistema de secreção do tipo VI (T6SS) | Thr quinase transmembrana) | Xanthomonas citri | Genética Bacteriana

Resumo

O cancro cítrico é uma doença bacteriana causada pela bactéria Gram-negativa Xanthomonas citri, que afeta grande parte dos citros comerciais, levando a danos significativos. Xanthomonas possui mecanismos complexos de sobrevivência e patogenicidade, incluindo vários sistemas de secreção. O Sistema de Secreção do Tipo VI (T6SS) se mostrou potencialmente crucial para a sobrevivência de X. citri em ambientes hostis, visto que é ativado em resposta à predação por protistas, como a ameba social do solo Dictyostelium discoideum.Estudos recentes identificaram a via de sinalização que desencadeia a expressão dos genes do T6SS em X. citri durante a interação com a ameba predadora. A cascata se inicia com a ativação da Ser/Thr quinase transmembrana PknS, que então fosforila o fator sigma EcfK. EcfK, por sua vez, leva à indução da transcrição dos genes do T6SS através da ativação do fator de transcrição TagK. No entanto, permanece desconhecido o sinal específico que PknS reconhece no periplasma, iniciando a cascata de eventos que leva à ativação do T6SS.Nesse sentido, o presente projeto visa entender melhor essa via de sinalização através do desenvolvimento de duas ferramentas principais. O projeto propõe a expressão e purificação do domínio periplasmático de PknS, visando investigar sua estrutura e possíveis interações com ligantes. Além disso, pretende-se criar uma linhagem bacteriana repórter capaz de indicar a ativação in vivo de EcfK. Especificamente, a linhagem reportaria a indução de tagK, um dos genes-alvo de EcfK, através da fusão de seu promotor à luciferase. Esta linhagem poderia ser utilizada para identificar condições e/ou moléculas que levam à ativação de EcfK, utilizando high throughput screenings.