Explorando o matrissoma da glândula mamária: análise da matriz extracelular em condições saudáveis e de desregulação endócrina

• Processo: 24/06057-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Sebastião Roberto Taboga
• Beneficiário: Thalles Fernando Rocha Ruiz
• Supervisor: Christiani Andrade Amorim
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universitè Catolique de Louvain (UCL), Bélgica
• Vinculado à bolsa: 22/00521-0 - Carcinogênese mamária em fêmeas senis induzida por Bisfenol A: influência de terapias hormonais no desenvolvimento neoplásico, BP.DR
• Assunto(s): Biologia tumoral Endocrinologia Histopatologia Matriz extracelular Reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biologia do câncer | Endocrinologia | Histopatologia | matriz extracelular | Microscopia e Microanálises | Biologia da Reprodução

Resumo

A biologia da glândula mamária (GM) apresenta alta complexidade relacionada ao estroma, o que requer intenso remodelamento dos componentes da matriz extracelular (MEC) influenciados por hormônios ovarianos. A paridade e o perfil hormonal são alterações intrínsecas que afetam a composição da MEC. O papel do microambiente estromal pode se estender ao desenvolvimento do câncer de mama, onde alterações nos proteoglicanos, glicosaminoglicanos (GAGs) e tipos de colágeno influenciam a progressão do tumor. Isto enfatiza a importância da composição da MEC na análise clínica e terapêutica, não apenas na carcinogênese, mas também numa perspectiva homeostática. Assim, pretendemos (1) desvendar o matrissoma da GM humana e (2) descrever a remodelação da MEC sob a GM exposta a desreguladores endóccrinos e terapias hormonais. Na primeira tarefa, nossa pesquisa demonstrará a expressão de elementos da MEC de amostras de GM humana (nulíparas e multíparas) do Hôpital Universitaire de Bruxelles em cooperação com a Université Catholique de Louvain, Bélgica. Exploraremos a expressão e localização de colágenos (I, III, IV e V), fibronectina, laminina-111 e -332 por técnicas de Western blotting e microscopia. Microscopia de Força Atômica (AFM) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) serão realizadas para detectar a elasticidade e o conteúdo fibrilar das amostras. LC-MS/MS e análise proteômica demonstrarão marcadores específicos para a estrutura da MEC e suas relações. Além disso, decodificaremos o conteúdo de proteoglicanos e GAG por análise glicômica usando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A segunda tarefa empregará técnicas da primeira tarefa para determinar o matrissoma MG sob desregulação endócrina e terapias de reposição hormonal (TRH). Nossos resultados anteriores demonstram o início da carcinogênese no modelo experimental (gerbil da Mongólia) e as TRH podem afetar a progressão tumoral. Os procedimentos experimentais foram concluídos e amostras de MG de gerbilo foram coletadas. As análises na UCLouvain integrarão proteômica e Western blotting de componentes da MEC com técnicas microscópicas para detectar assinaturas de colágeno associadas a tumores (Tumor-associated collagen signatures) e a remodelação de componentes da membrana basal (colágeno IV, nidogênio, perlecan). As técnicas de glicômica (análise molecular dos GAGs), bioquímica e histoquímica completarão o matrissoma MG, detectando alterações no perfil de proteoglicanos/GAGs. Assim, os resultados combinados de proteômica, glicômica e microscopia identificarão características relacionadas à GM normal e ao microambiente alterado da mesma, associadas a condições de paridade e terapias hormonais.