O impacto da deleção do gene Nr1d1 no músculo esquelético de camundongos obesos

• Processo: 23/15884-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2029
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Educação Física
• Pesquisador responsável: Adelino Sanchez Ramos da Silva
• Beneficiário: Danielle Naves Ribeiro
• Instituição Sede: Escola de Educação Física e Esporte de Ribeirão Preto (EEFERP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/11820-5 - Função do Nr1d1 sobre a Sarcopenia associada ao envelhecimento, AP.TEM
• Assunto(s): Ritmo circadiano Músculo esquelético Obesidade Proteômica Camundongos knockout
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ciclo Circadiano | knockout | Músculo esquelético | obesidade | proteômica | Ciências da Saúde - Educação Física

Resumo

A alteração dos ritmos circadianos tem sido demonstrada como um dos principais fatores de risco para desenvolver obesidade e diabetes tipo 2. O receptor nuclear Nr1d1 (Rev-erb±) é um componente central do ciclo circadiano e tem sido destacado como um elo essencial entre o ciclo circadiano e o metabolismo. Observou-se que a proteína Rev-erb± exerce um controle meticuloso sobre a via da autofagia, a qual mantém uma relação direta com a obesidade. Dado que os genes envolvidos no ritmo circadiano desempenham um papel significativo na regulação do equilíbrio energético em mamíferos, a interrupção desses genes pode contribuir para o desenvolvimento da obesidade e da síndrome metabólica em camundongos. Portanto, a compreensão da função do gene Nr1d1 (Rev-erb±) no tecido muscular esquelético e das vias moleculares que esta proteína é capaz de modular na condição de obesidade assume uma importância crucial no avanço do conhecimento acerca da função desta proteína. Assim, o objetivo primordial do presente trabalho é verificar se animais obesos, por indução de dieta hiperlipídica, sem o gene Nr1d1 no músculo esquelético, apresentariam uma exacerbação da patogênese da obesidade na saúde muscular (composição e tamanho muscular, desempenho, adiposidade, inflamação etc.), bem como a resposta da autofagia frente a esse cenário, em comparação com seus pares controle. Serão utilizados camundongos homozigotos flox do gene Nr1d1 e camundongos knockout (KO) condicional (músculo esquelético) do gene Nr1d1 com dieta controle e dieta hiperlipídica (HFD), além de animais que serão transfectados com o vírus adeno-associado para superexpressão da Rev-erb±. Os animais serão submetidos aos testes metabólicos e avaliações de desempenho físico, antes e após um período de oito semanas de dieta hiperlipídica, para verificação da interferência da dieta e modelo genético nos parâmetros físicos e metabólicos. Após os testes, serão removidos o sangue e músculo esquelético (sóleo, extensor longo dos dedos - EDL, e tibial anterior - TA) e estocados em -80ºC, para análises bioquímicas, reação em cadeia da polimerase - transcriptase reversa quantitativa (RTq-PCR), immunoblotting, análises estereológicas, ressonância paramagnética eletrônica (RPE), proteômica e bioinformática. Os resultados serão expressos em média ± desvio padrão da média. Todas as análises serão bilaterais e o nível de significância será pré-fixado em pd0,05. (AU)