Análise da histopatologia e mecanismos moleculares envolvidos na retina falciforme- camundongos humanizados HbSS-Townes.

• Processo: 24/15057-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mônica Barbosa de Melo
• Beneficiário: Maria Eduarda Guimarães Gonzalez
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/18886-1 - Mecanismos fisiopatológicos e tratamento das anormalidades das células vermelhas do sangue, AP.TEM
• Assunto(s): Anemia falciforme Histologia Hematologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anemia falciforme | Camundongo Townes | Histologia | Hematologia

Resumo

As complicações oftalmológicas são frequentes nas doenças falciformes e incluem anormalidades na conjuntiva, infartos orbitários, retinopatia e hemorragia retiniana. As alterações retinianas são as mais importantes para a morbidade ocular nas doenças falciformes, especialmente sua forma proliferativa, que se configura como maior causa de perda progressiva da visão nesses pacientes, levando ao comprometimento visual em 10 a 20% dos olhos afetados. A estimativa da prevalência da retinopatia falciforme proliferativa é de 32,8% na hemoglobinopatia em heterozigotos compostos HbSC, 14% na S-beta talassemia e 2,6% na anemia falciforme ou hemoglobinopatia em homozigotos HbSS. Devido às dificuldades de se obter a retina humana para realização de ensaios experimentais, nosso objetivo neste projeto é a utilização de camundongo HbSS-Townes, como modelo para identificação da expressão gênica diferencial e caracterização das proteínas envolvidas na retinopatia falciforme. Para isso, pretendemos utilizar camundongos fêmeas das seguintes linhagens: C57BL/6J como grupo controle (N=55) e B6.129- Hbatm1(HBA)Tow/Hbbtm2(HBG1, HBB*) Tow/Hbbtm3(HBG1, HBB) Tow/J como grupo HbSS-Townes (N=55), ambos os grupos com 240 dias de idade (8 meses). Ao atingir os 8 meses, será analisada a resposta funcional da retina em ambos os grupos C57BL/6J e HbSS- Townes, através de eletrorretinograma (ERG) (N= 10/grupo). O presente projeto propõe a caracterização morfológica da retina de camundongos Townes e controles C57BL/6J (HbAA) por coloração de hematoxilina eosina, bem como a identificação, por imuno-histoquímica, dos marcadores de angiogênese: fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e fator induzido por hipóxia 1 e 2 (HIF-1 e HIF-2). A caracterização das alterações morfológicas retinianas auxiliará no melhor entendimento da fisiopatologia da retinopatia falciforme, especialmente em sua forma proliferativa. Os genes/proteínas resultantes de outros projetos serão avaliados por RT-qPCR (N= 8/ grupo) e Western Blot (N=8/grupo). Com isso, acreditamos que os resultados obtidos no presente projeto poderão contribuir para um melhor entendimento dos mecanismos envolvidos na retinopatia falciforme e servir como base para subsequentes estudos.