Estudo aprofundado de espermatóforos e dos aspectos reprodutivos do copépode Notodiaptomus spinuliferus (Dussart & Matsumura-Tundisi, 1986) com técnicas variadas de imagens e de biologia molecular

• Processo: 24/21625-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 22 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Zoologia - Zoologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Gilmar Perbiche Neves
• Beneficiário: Paulo Henrique Cardilli Hor
• Supervisor: Nancy Fabiola Mercado Salas
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Leibniz Institute For The Analysis Of Biodiversity Change, Hamburg, Alemanha
• Vinculado à bolsa: 24/08354-0 - Desvendando a morfologia e a ultraestrutura de espermatóforos do copépode Notodiaptomus spinuliferus (Dussart & Matsumura-Tundisi, 1986), BP.IC
• Assunto(s): Crustacea Reprodução Copepoda
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crustacea | Espermatoforo | Reprodução | Copepoda

Resumo

O projeto em questão tem como objetivo investigar a morfologia, ultraestrutura e aspectos reprodutivos dos espermatóforos da espécie Notodiaptomus spinuliferus, um copépode de água doce amplamente distribuído no estado de São Paulo, Brasil. Embora existam muitos estudos sobre a morfologia de copépodes, há uma escassez significativa de pesquisas focadas na estrutura reprodutiva, especialmente em ambientes de água doce. Para preencher essa lacuna, o projeto adota uma abordagem multidisciplinar que combina técnicas avançadas de microscopia e análises moleculares.As amostras de N. spinuliferus serão coletadas em diversos ambientes aquáticos no estado de São Paulo, como lagos e represas, com as coordenadas geográficas dos locais de coleta sendo registradas para garantir a rastreabilidade. As amostras serão preparadas para análise utilizando diferentes soluções de fixação, dependendo da técnica a ser aplicada. Para microtomografia computadorizada (MicroCT), as amostras serão fixadas em álcool 96%, enquanto para análises moleculares, utilizar-se-á álcool absoluto. Para microscopia confocal a laser, as amostras serão fixadas em formalina ou glicerina com álcool.As análises morfológicas externas e internas dos espermatóforos serão realizadas por meio de microscopia óptica comum e eletrônica de transmissão, permitindo observar a anatomia e ultraestrutura dos espermatóforos. A microtomografia computadorizada será utilizada para obter imagens tridimensionais dos espécimes sem danificá-los, facilitando a compreensão do mecanismo de fixação do espermatóforo na fêmea. Além disso, imagens também serão obtidas utilizando microtomografia de raios-X síncrotron, em parceria com o Karlsruher Institut für Technologie (KIT), onde especialistas auxiliarão na obtenção e análise das imagens.A técnica de microscopia confocal a laser será empregada para estudar o mecanismo de adesão do espermatóforo ao segmento genital da fêmea, utilizando uma variedade de corantes para facilitar a identificação das diferentes estruturas. As análises moleculares buscarão verificar se há comportamento reprodutivo interespecífico entre copépodes e catalogar o material genético da espécie ainda não registrado. Para isso, serão analisados genes ribossomais 18S e 28S, além do COI (DNA mitocondrial). O material genético será extraído utilizando kits específicos e amplificado por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), com os resultados sendo organizados para sequenciamento e depositados no GenBank.Os resultados obtidos serão analisados de forma integrativa e comparativa, reunindo as informações das diversas técnicas aplicadas. Modelos tridimensionais gerados através do escaneamento das lâminas histológicas, MicroCT e raios-X síncrotron serão comparados para garantir uma visão abrangente das características morfológicas dos espécimes. Um foco especial será dado ao segmento genital e aos espermatóforos, com dados moleculares sendo tratados estatisticamente para verificar a compatibilidade do DNA encontrado com N. spinuliferus, além de verificar cruzamentos intraespecíficos.