Efeito na proteína kinase A (PKA) na expressão e atividade do trocador Na+/H+ isoforma 3 (NHE3) em modelo de isquemia e reperfusão.

• Processo: 25/03043-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Maria Oliveira de Souza
• Beneficiário: Natalia Marques Guilherme
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Isquemia e reperfusão NHE3 Fisiologia renal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Isquemia e Reperfusão | Nhe3 | pH intracelular | Pka | Fisiologia Renal

Resumo

A injúria renal aguda (IRA) induzida por isquemia/reperfusão (IR) contribui para uma alta taxa de morbidade e mortalidade em uma ampla gama de lesões. Nessa condição, as células tubulares renais sofrem lesões graves que podem interferir na homeostase do organismo, incluindo o balanço de sódio e água, visto que as lesões nos epitélios tubulares impedem a função adequada dos transportadores de sódio como o trocador Na+/H+, isoforma 3 (NHE3), o cotransportador Na+:K+:2Cl- (NKCC2), o cotransportador Na+:Cl- (NCC), os canais para Na+ (ENACs) e a Na+/K+/ATPase. Contudo, em se tratando de IR, a maioria dos estudos focam na função do túbulo proximal. Assim, a nossa hipótese é que a IR pode também induzir lesão no segmento espesso ascendente da alça de Henle, o que resulta em alterações na expressão e atividade de NHE3. O objetivo deste estudo é investigar a relação entre a lesão da alça espessa e a atividade do NHE3, observando a contribuição da via de sinalização da PKA. Para este fim, serão utilizados modelos in vivo e in vitro de IR. Camundongos C57BL/6J de oito semanas de idade submetidos à IR renal bilateral serão comparados ao grupo sham. As células ST1 (linhagem celular tubular proximal de camundongo) serão submetidas à IR por tratamento com antimicina A (5 µM) e/ou H-89 (1 µM, inibidor de PKA) e comparadas aos respectivos controles. Para tal, serão utilizadas técnicas de isquemia e reperfusão, western blotting, coloração por trypan blue, imunofluorescência e medidas de pH intracelular.