Desenvolvimento e validação de método analítico alvo-dirigido para quantificação de ácidos biliares primários e secundários através de LC-MS/MS: perfil na obesidade

• Processo: 25/02042-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Carlos Arterio Sorgi
• Beneficiário: Luiz Felipe Marques Rodrigues
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Ácidos e sais biliares Obesidade Lipídeos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ácidos Biliares | Bioanaítica | espectometria de massas | obesidade | Lipídios

Resumo

Os ácidos biliares (ABs) desempenham papéis fundamentais na digestão e no metabolismo lipídico, envolvidos na regulação da homeostase do colesterol. Alterações em suas concentrações podem estar associadas a doenças metabólicas como obesidade e diabetes tipo 2, agindo como um mediador de sinalização celular e modulador da inflamação. No entanto, a quantificação desses lipídios demanda desafios, principalmente pela presença de isômeros estruturais e conjugados microbianos (MCABs), o que torna necessário métodos analíticos avançados para uma identificação confiável. Portanto, a justificativa para o nosso estudo perfaz essa limitação dos métodos analíticos atuais na validação e quantificação do metabólito de ABs, comprometendo a precisão de resultados clínicos. Assim, nossos objetivos consiste em utilizar uma tecnologia de espectrometria de massas de alta resolução (LC-MS/MS), do moderno sistema ZenoTOF 7600, para diferenciar eficientemente os isômeros através de estudos de fragmentação por Dissociação Ativada por Elétrons (EAD, do inglês), e fornecer um perfil detalhado dos ABs em amostras de plasma humano. Essa metodologia permitirá uma análise mais sensível e robusta, sendo essencial para os estudos clínicos relacionados com a regulação de ABs na obesidade. Para isso, realizaremos a validação do método analítico, como linearidade, limite de detecção, exatidão e precisão. Como também, avaliaremos a eficiência de recuperação através da padronização de métodos de extração da matriz biológica, utilizando técnicas com precipitação protéica e extração bifásica. As análises estatísticas serão conduzidas para avaliar as diferenças entre os grupos de indivíduos obesos e eutróficos, determinando potenciais biomarcadores associados aos distúrbios metabólicos. Nossos resultados poderão fornecer subsídios para novas estratégias terapêuticas voltadas à obesidade e suas comorbidades, além de impulsionar avanços na área de bioanalítica e biotecnologia dos ABs.