Análise integrativa do transcriptoma e proteoma das ilhotas pancreáticas isoladas da prole de ratos machos submetidos à restrição proteica materna: caracterização e estudos funcionais

• Processo: 25/00542-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2029
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Luis Antonio Justulin Junior
• Beneficiário: Ana Beathriz Leite Lorente
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Ilhotas pancreáticas Proteoma Transcriptoma Biologia do desenvolvimento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: DOHaD | Ilhotas pancreáticas | Proteoma | restrição proteica materna | Transcriptoma | Biologia do desenvolvimento

Resumo

O conceito de DOHaD (Origem Desenvolvimentista da Saúde e da Doença) busca entender como eventos iniciais do desenvolvimento estão associados à ocorrência de doenças na vida adulta e no envelhecimento. Nesse contexto, a restrição proteica materna (RPM) em roedores é amplamente utilizada como modelo experimental para investigar esses processos. Evidências indicam que a RPM afeta negativamente a secreção de insulina e aumenta a vulnerabilidade das células beta pancreáticas ao estresse oxidativo, contribuindo para o surgimento de síndromes metabólicas mais tarde no envelhecimento, como o diabetes tipo 2 (DM2). Este estudo visa analisar o perfil de expressão de RNAs mensageiros nas ilhotas pancreáticas de ratos submetidos à RPM, seguido de integração com dados proteômicos para identificar vias moleculares associadas a disfunções pancreáticas. Para isso, serão utilizados ratos da linhagem Sprague Dawley, distribuídos nos grupos Controle (17% de proteína) e RPGL (6% de proteína) durante a gestação e lactação. No 21º dia pós-natal, a prole será pesada, eutanasiada e o pâncreas coletado e processado para análises morfológicas e moleculares. As ilhotas pancreáticas serão isoladas para extração de RNA, preparo de biblioteca e sequenciamento (HiSeq2500). Genes diferencialmente expressos serão identificados (DESeq2, p < 0,05), e os dados transcriptômicos serão integrados ao proteoma (processo FAPESP: 2023/06412-0). A partir dos dados de integração dos dados ômicos, serão selecionados alvos moleculares para a realização de análises funcionais em modelo in vitro, com células beta pancreáticas imortalizadas (RIN-5F) e com células humanas, em colaboração com o Joslin Diabetes Center (EUA), em um projeto BEPE a ser submetido. Os achados serão validados por RT-qPCR e imunofluorescência. Este estudo busca compreender os mecanismos moleculares subjacentes à programação intrauterina e seu possível papel na desregulação de biomarcadores pancreáticos relacionados ao desenvolvimento de doenças crônicas não-transmissíveis, segundo o conceito DOHaD. Tais resultados podem contribuir para o entendimento da importância de cuidados nutricionais às gestantes e durante a primeira infância, assim como reforçar a importância de políticas públicas para a prevenção de doenças metabólicas desde as fases iniciais do desenvolvimento.