Expressão e Caracterização de Fragmento de Anticorpo do Tipo scFv Inibidor de Calicreína Tecidual Humana 7

• Processo: 25/04504-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Vitor Marcelo Silveira Bueno Brandão de Oliveira
• Beneficiário: Samara Evangelista da Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Dermatite atópica Anticorpos de cadeia única
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpo de fusão | dermatite atópica | hKLK7 | Lup37C11 | ScFv | Produção de anticorpo de fusão

Resumo

A Dermatite Atópica (DA) é uma doença que atinge cerca de 7,3% da população brasileira na faixa etária entre 6 e 7 anos, e tem prevalência de cerca de 1% a 3% da população adulta mundial. A DA se caracteriza por três sintomas principais, descamação excessiva da pele, prurido e eritema (vermelhidão), sendo uma doença crônica que tende a suavizar ao longo da vida do indivíduo. Porém, em alguns casos a doença pode prevalecer por toda a vida do paciente, exigindo tratamento constante durante os episódios de crise. Estudos apontam que a atividade exacerbada das serino proteases da família das calicreínas (hKLKs), em especial da hKLK7 e hKLK5, contribui para o desenvolvimento e agravamento da DA, de modo que fármacos que controlem a atividade dessas enzimas são de grande interesse para o tratamento dessa doença. Em indivíduos saudáveis, a hKLK7, junto com outras proteases da família das calicreínas, tem o papel de realizar a descamação natural do extrato córneo. Porém, quando a atividade exacerbada da enzima pode levar ao quadro de DA e outras doenças de pele, como a psoríase e a Síndrome de Netherton.Este trabalho propõe o uso de E. coli linhagem SHuffle® T7 para a produção do anticorpo LUP37C11 em sua forma scFv. A linhagem SHuffle® T7 é recomendada para a produção de proteínas recombinantes que possuem pontes dissulfeto, como é o caso do anticorpo alvo. Após a produção, o anticorpo será purificado e sua capacidade de reconhecer e inibir a hKLK7 será aferida através de ensaio de ELISA e cinética enzimática.