Envolvimento de microRNAs na resistência à insulina no fígado de ratos diabéticos tipo 2 não obesos, submetidos ao transplante de medula óssea

• Processo: 25/06630-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Sandro Massao Hirabara
• Beneficiário: Débora Aluiza Veríssimo
• Instituição Sede: Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa. Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Diabetes mellitus tipo 2 Fígado Medula óssea MicroRNAs Resistência à insulina Transplantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diabetes Mellitus tipo 2 | fígado | Medula Óssea | miRNA | resistência a insulina | transplante | Metabolismo e Epigenética

Resumo

O diabetes tipo 2 é uma condição metabólica caracterizada pela hiperglicemia crônica e diminuição da sensibilidade à insulina em tecidos sensíveis a esse hormônio, e segundo organizações internacionais de saúde, representa preocupação mundial devido a sua alta prevalência, sobretudo por consequência de mudanças no estilo de vida (dieta e atividade física) e fatores genéticos. Comumente, o DM2 está associado à obesidade; no entanto, uma parcela significativa dos indivíduos com essa síndrome não apresenta obesidade e ainda pouco se sabe sobre os mecanismos que levam a essa condição. Sabe-se que o metabolismo de glicose em resposta à insulina é prejudicado no fígado de pacientes com DM2 e alguns estudos são sugestivos de que os microRNAs (miRs) podem estar envolvidos nesses efeitos. Além disso, pesquisas conduzidas têm proposto que o transplante de células-tronco tem potencial efeito na diminuição da hiperinsulinemia e hiperglicemia, embora os mecanismos associados sejam desconhecidos no DM2 sem obesidade. O fígado desempenha papel crucial no metabolismo energético do organismo, participando diretamente de processos envolvidos na liberação de glicose em períodos de jejum prolongado e no armazenamento de glicose em forma de glicogênio, assim como, no metabolismo lipídico mediante síntese de lipoproteínas, reforçando ainda mais sua ligação com a patogênese do DM2. Portanto, o presente projeto tem como objetivo avaliar o envolvimento dos miRs na resistência à insulina e metabolismo de glicose no fígado de ratos Goto-Kakizaki (GK), modelo animal de DM2 sem obesidade, submetidos ou não ao transplante de medula óssea procedente de ratos Wistar (WT). Animais WT e GK machos, de 28 dias, serão imunossuprimidos pelos fármacos bussulfano (20 mg/kg) e ciclofosfamida (150 mg/kg). Após isso, receberão 2 x 107 células da medula óssea de WT doadoras (normoglicêmicas), via veia caudal. A glicemia de jejum será acompanhada nos dias 30, 60 e 90 após o transplante; no dia 100, a eutanásia será realizada e o fígado coletado para futuras análises de proteínas (AKT-1/2, GSK3-¿, GLUT-2, FOXO-1, SREBP), enzimas (PFK-1, CS, GP e PEPCK) e citocinas (IL-6, IL-1¿ e TNF-¿; IL-10) que participam do metabolismo de glicose e resistência hepática à insulina, utilizando-se as técnicas de PCR em tempo real e Western Blotting. Também, serão avaliados miRs potencialmente relacionados aos processos de resposta à insulina, metabolismo de glicose e metabolismo lipídico (miR-143, miR-122, miR-26a, miR-195, miR-338-3p e miR-499-5p) pela técnica de RT-PCR em tempo real. (AU)