Ambiente folicular e seu papel na aquisição de competência oocitária: Modelos experimentais para desvendar mecanismos associados à entrega de miRNAs ao citoplasma oocitário

• Processo: 25/13194-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2029
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Juliano Coelho da Silveira
• Beneficiário: Camila Azzolin de Souza
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06645-0 - Vesículas extracelulares como uma plataforma para diagnóstico e manipulação do sistema de produção in vitro de embriões: a nova geração da reprodução animal, AP.JP2
• Assunto(s): MicroRNAs Produção in vitro de embriões
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ambiente Folicular | miRNAs | produção in vitro de embriões | qualidade oocitária | Vacas Repetidoras de estro | Vesículas extracelulares modificadas | Biotecnologias da Reprodução Animal

Resumo

As tecnologias de reprodução assistida têm o potencial de acelerar o melhoramento genético e aprimorar a eficiência produtiva e reprodutiva dos rebanhos, além de representar uma ferramenta crucial no tratamento de fertilidade humana. Entretanto, apenas uma pequena parte dos complexos cumulus-oócitos que são maturados in vitro atingem o estágio de blastocisto, os quais apresentam uma qualidade inferior àqueles produzidos in vivo. Assim, a inabilidade de mimetizar os processos fisiológicos que ocorrem dentro do ambiente folicular está diretamente ligada ao êxito das biotecnologias reprodutivas. Diante disso, nos últimos anos tem-se sugerido a entrega de materiais biológicos para as células do cumulus in vitro, na tentativa de assemelhar a maturação in vitro com um ambiente folicular dinâmico, aumentando a qualidade oocitária. Além disso, sabe-se que desafios sistêmicos e o próprio microambiente folicular podem impactar na competência. Sendo assim, com o presente projeto objetivamos investigar se miRNAs presentes em vesículas extracelulares (VEs) do fluido folicular (FF) são capazes de modular o conteúdo molecular do oócito e impactar a aquisição de competência do gameta feminino. Para isso iremos realizar três experimentos. O primeiro deles objetiva-se explorar as rotas de endocitose e os mecanismos de transporte intracelular das VEs pelas células do cumulus e o transporte de miRNAs para o citoplasma oocitário. No segundo experimento, iremos identificar miRNAs biomarcadores de qualidade do ambiente folicular, in vitro e in vivo. No terceiro experimento, iremos investigar o impacto da suplementação de VEs enriquecidas sinteticamente com miRNAs marcadores de qualidade do ambiente folicular e oocitária na produção in vitro de embriões em animais que possuem histórico de falhas gestacionais em decorrência de baixa qualidade oocitária. Os resultados obtidos serão, primeiramente, analisados a fim de verificar se os mesmos atendem aos critérios de homoscedasticidade e normalidade. Em seguida, para cada experimento, serão aplicados os testes estatísticos mais apropriados, de acordo com o número de de grupos comparados, considerando um nível de significância de p¿0,05, com o auxílio dos programas GraphPad Prism e o Software R Studio. Assim, esse projeto busca contribuir com processos fisiológicos, ainda, poucos explorados, os quais podem ser importantes ferramentas para incrementar a produção in vitro de embriões, tanto na área animal, como humana. (AU)