Expressão e purificação da região C-terminal da proteína FtsH de tomate em "E. coli" para desenvolvimento de anticorpos policlonais

• Processo: 01/03114-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
• Pesquisador responsável: Márcio de Castro Silva Filho
• Beneficiário: Camila Motta Borgonove
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica Planticorpos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos Policlonais

Resumo

Um importante mecanismo envolvido no controle da expressão gênica é a degradação de proteínas regulatórias via proteases celulares. Uma classe particular de proteases cloroplásticas, semelhante à FtsH bacteriana, foi encontrada em plantas, ancorada na membrana dos tilacóides no interior dos cloroplastos. O gene para esta protease foi recentemente clonado em nosso laboratório em plantas de tomate. No entanto, muito pouco ainda é conhecido no que se refere aos mecanismos de sua regulação. Uma abordagem a ser explorada é o estudo da expressão gênica utilizando-se técnicas imunológicas, que permitem determinar a regulação temporal e espacial da proteína FtsH. Para tanto, é necessário desenvolver anticorpo contra a proteína FtsH, que serão de grande utilidade na realização deste tipo de experimento. Dessa forma, o presente projeto de pesquisa tem como objetivo clonar a região C-terminal da protease FtsH de tomate em um vetor de expressão bacteriana, onde o antígeno purificado será usado na produção de anticorpos policlonais. (AU)