Clonagem e expressão funcional da oxidase alternativa de Moniliophtora perniciosa, agente etiológico da vassoura-de-bruxa no cacaueiro

• Processo: 09/50877-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira
• Beneficiário: Gabriel Francisco Zaniboni
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Vassoura-de-bruxa Saccharomyces cerevisiae Oxidase alternativa Moniliophthora perniciosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fase Biotrofica | Moniliophtora Perniciosa | Oxidase Alternativa | Saccharomyces Cerevisae | Vassoura-De-Bruxa

Resumo

Moniliophthora perniciosa o um fungo basidiomiceto causador da doença vassoura-de-bruxa do cacaueiro. Este patógeno apresenta duas fases miceliares principais em seu ciclo de vida, a fase biotrófica, em que o fungo apresenta hifas monocarióticas de crescimento lento e a fase necrotrófica, cujas hifas são dicarióticas e de rápido crescimento. O uso de fungicidas a base de inibidores da cadeia respiratória principal específicos para fungos vêm sendo testados. M. perniciosa tem se mostrado resistente, em especial na fase biotrófica de desenvolvimento. Uma possível explicação para tal resistência é a atividade de uma oxidase alternativa (AOX), que já vem sendo caracterizada. Oxidases Alternativas são capazes de realizar o transporte de elétrons em situações em que a via principal encontra-se inibida, sem produção concomitante de ATP. Estudos recentes mostraram que em M. perniciosa, a AOX aparentemente tem um papel chave na fase biotrófica de desenvolvimento do patógeno. A compreensão de sua função real no desenvolvimento do fungo ainda não foi possível, pois uma técnica efetiva para produção de mutantes de M. perniciosa ainda não foi desenvolvida. Este projeto visa a caracterização funcional da AOX de M. perniciosa através da clonagem e expressão do gene Mp-Aox em Saccharomyces cerevisiae. As leveduras transformadas serão utilizadas em ensaios de consumo de oxigênio, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e avaliação da taxa de crescimento. Espera-se, com os resultados obtidos, simular a fase biotrófica de desenvolvimento do fungo na levedura transformada e assim confirmar a real função desta enzima para o patógeno. (AU)