Geracao de novos alelos temperatura-sensiveis do gene codificador de eif5a em saccharomyces cerevisiae.

• Processo: 03/07236-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sandro Roberto Valentini
• Beneficiário: Suzana Marini Rangel
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14948-4 - Fator de iniciação de tradução de eucariotos - 5a(eIF-5A) e o metabolismo de RNA mensageiro, AP.JP
• Assunto(s): Saccharomyces cerevisiae Fator de iniciação 5A em eucariotos TIF51A
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alelos Temperatura Sensiveis | Elf5A | Saccharomyces Cerevisiae | Tif51A

Resumo

O fator de início de tradução de eucariotos 5A (elF5A) está presente nos organismos desde arquebactérias a mamíferos e é a única proteína conhecida que contém o aminoácido incomum hipusina, formado através de uma modificação pós-traducional em um resíduo de lisina. A presença de hipusina na estrutura de elF5A é fundamental para a sua atividade, que parece estar relacionada a diferentes fenômenos celulares tais como a síntese de proteínas, proliferação celular, trânsito nucleocitoplasmático e decaimento de RNA mensageiro. Em Saccharomyces cerevisiae cultivada sob aerobiose, elFSA é codificado pelo gene TIF51A, o qual é essencial nesta condição. Até o momento, quatro alelos condicionais deste gene sensíveis a temperatura foram isolados em leveduras. No entanto, todas as mutações identificadas levam a uma degradação da proteína mutante na temperatura não permissiva, o que dificulta a utilização desses mutantes em rastreamentos genéticos e ensaios funcionais. No presente estudo pretende-se gerar alelos condicionais de TIF51A utilizando a técnica de PCR mutagênica e selecionar aqueles que não resultam em elF5A instável na temperatura não permissiva. (AU)