Analise da morfologia e do perfil de restricao dos telomeros de "leishmania amazonensis" em relacao a idade replicativa do parasita.

• Processo: 01/04267-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Isabel Nogueira Cano
• Beneficiário: Miriam Aparecida Giardini
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 00/01138-6 - Complexo telomérico de Leishmania spp: dinâmica da replicação, otimização da purificação da telomerase e identificação de possíveis componentes da holenzima, AP.JP
• Assunto(s): Leishmania mexicana Curvas de crescimento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Curva De Crescimento | Idade Replicativa | Leishmania Amazonensis | Sincronizacao De Culturas

Resumo

Será estudado o perfil de restrição dos telômeros (TRF "terminal restriction fragment") como marcadores da idade replicativa de parasitas-do gênero Leishmania amazonensis, na forma promastigota. Os parasitas serão mantidos em culturas não sincronizadas com crescimento exponencial e em fase estacionária, e em culturas exponenciais sincronizadas com N-hidroxi-uréia na fase S do ciclo celular. Os TRFs serão determinados por "Southern blotting" de géis contendo DNA genômico digerido com diferentes enzimas de restrição e hibridizado com sonda da seqüência telomérica. A monitoração microscópica das populações de parasitas sincronizadas é não sificronizadas será realizada utilizando-se ensaios citoquímicos para expressão de beta-galactosidase em pH 6,0 e coloração com DAPI. Estes experimentos serão complementares na determinação do potencial replicativo das células e na Verificação de possíveis mudanças morfológicas relacionadas com envelhecimento celular in vitro. Desta forma, os resultados obtidos neste projeto poderão sugerir se existe relação entre a dinâmica da replicação das seqüências teloméricas e a idade replicativa dos parasitas, e por conseguinte com a sobrevivência do parasita em cultura. (AU)