Modificacao do citocromo c pelo chald

• Processo: 08/52444-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2008
• Data de Término da vigência: 10 de fevereiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Sayuri Miyamoto
• Beneficiário: Fernando Valentim Mansano
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Colesterol Oxigênio singleto LDL-Colesterol Doenças neurodegenerativas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aldeido | Colesterol | Doencas Neurodegenerativas | Ldl | Oxiesterois | Oxigenio Singlete

Resumo

O colesterol é um dos lipídeos neutros mais abundantes encontrados em membranas biológicas. Sua oxidação resulta na formação de hidroperóxidos, aldeídos, e epóxidos, chamados em conjunto de oxiesteróis. Níveis elevados de oxisterois têm sidos associados a doenças cardiovasculares e neurodegenerativas. Recentemente, estudos mostraram a formação de colesterol secoaldeido (3β-hidroxi-5-oxo-5,6-secocolestan-6-al, Csec) e sua forma aldolizada, o colesterol carboxiaideído (3β-5-dihidroxi-5β-B-norcolestane-6β-carboxialdeido, ChAld) em placas ateroscleróticas e atribuíram a formação destes produtos à oxidação mediada por ozônio gerado em meio biológico. No entanto, esta atribuição é controversa, uma vez que estudos em nosso laboratório verificaram a formação desses dois compostos, em particular de ChAld, na reação do colesterol com o oxigênio singlete. A investigação dos mecanismos responsáveis pela formação destes aldeídos em meio biológico está em andamento. Para esta finalidade faz-se necessário a utilização de técnicas sensíveis e específicas de detecção de ChAld em sistema biológico. Neste estudo propomos a utilização de uma sonda fluorescente para a detecção e quantificação de ChAld de modo específico. A técnica baseia-se na análise do adulto formado entre a sonda e o ChAld por HPLC acoplado a um detector de fluorescência. A eficiência desta nova metodologia será avaliada por meio da utilização da sonda fluorescente para a detecção de ChAld em amostras de LDL e em neuroblastomas submetidos à oxidação in vitro. (AU)