Caracterização molecular e estudo da expressão do gene da isoforma 1 da proteína CGI-72 na diferenciação de eritrócitos e em doenças de linhagem vermelha

• Processo: 04/05230-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2004
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2004
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Fernando Ferreira Costa
• Beneficiário: Flavia Oliveira Pinho
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Eritropoese Etiquetas de sequências expressas Transcrição genética Expressão gênica Eritrócitos Hematologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cgi-72 | Eritropoiese | Mbt | Tudor

Resumo

Com o auxílio de um banco de dados eletrônico sobre ESTs (expressed sequence tags) durante a eritropoiese (http://hembase.niddk.nih.gov), encontramos a seqüência do gene da isoforma 1 da proteína CGI-72 (comparative gene identification-72) de Homo sapiens, que foi obtida através de um estudo comparativo do proteoma de Caenorhabditis elegans com o humano provindo de ESTs no qual novos genes ortólogos humanos foram descobertos à isoforma 1 da CGI-72 não possui função estabelecida na literatura, porém possui dois domínios: Tudor e MBT. O primeiro está presente em proteínas que se ligam a RNA e DNA e o outro presente nas relacionadas com a regulação da transcrição gênica. Estão incluídos no projeto a comprovação da expressão do gene da isoforma 1 da CGI-72 em eritrócitos através da técnica de PCR, feito a partir de cDNA de vários estágios de uma cultura de eritrócitos em diferenciação, sequenciamento do mesmo e análise de sua expressão ao longo da eritropoiese. Experimentos, também, serão feitos para comparar sua expressão em células de cultura de linhagem normal, K562 e HEL tratadas com eritropoietina, ácido retinóico e hidroxi-uréia, bem como, em demais tecidos humanos através das técnicas de "Northern Blotting" e "Real-time PCR". O nosso objetivo é contribuir para o conhecimento sobre a expressão do gene de CGI-72 em humanos, particularmente, em células eritróides normais em diferenciação e em algumas doenças hematológicas. (AU)